木霉属通用PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：木霉属通用PCR检测试剂盒

英文名称：Trichoderma spp.PCR

组成及试剂配制:

1、 酶标板：一块（96孔）

2、 标准【zhǔn】品（冻干品）： 2瓶，请临用【yòng】前【qián】15分钟内配制。每瓶以样品【pǐn】稀【xī】释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同【tóng】时【shí】反复颠倒/搓动以【yǐ】助溶解，其浓【nóng】度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要【yào】直接在板中【zhōng】进【jìn】行倍比稀【xī】释【shì】），分别配【pèi】制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为【wéi】空白【bái】孔 0 U/L。如配制【zhì】100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准【zhǔn】品加入含有【yǒu】0.3ml样【yàng】品【pǐn】稀释液的Eppendorf管中，混【hún】匀即可，其余【yú】浓度以【yǐ】此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：

1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集。

2、木霉属通用PCR检测试剂盒存【cún】放：样本【běn】在2~8℃条件【jiàn】下保存应不超【chāo】过72h，-70℃以下可长期保存【cún】，但应避免反复冻融（zui多【duō】冻融3次）。

3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。

特点优势：

1.特异性【xìng】：所【suǒ】有产品使用的【de】引物均经过【guò】详尽【jìn】的【de】生【shēng】物【wù】信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据【jù】库的比【bǐ】对，确【què】保所用的【de】每【měi】一条引物【wù】均【jun1】为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对种属及血清型的【de】特异检测，特异性均达到100%。

2.重现【xiàn】性：该系列所有产品均经过大量实验菌株【zhū】的验证，重现【xiàn】性【xìng】为【wéi】100%。

3.灵【líng】敏性：该系列产品可【kě】实现【xiàn】对检【jiǎn】测菌的高灵敏检测【cè】，当样【yàng】品中的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接【jiē】检【jiǎn】测，无需【xū】繁琐的增菌过程。

4.实【shí】用【yòng】性：检【jiǎn】测范围广，涵盖【gài】了对人体危害较【jiào】为【wéi】严【yán】重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样【yàng】的快速检测，整【zhěng】个检测过程【chéng】为9-21个小时。

5.优势【shì】1：序列资【zī】源丰富，除GenBank公布的【de】序【xù】列外【wài】，公司还进行了大量【liàng】菌株的序列破译，从理论【lùn】上保证所【suǒ】选【xuǎn】引物具有良好的保守性【xìng】和特异性。

6.优势【shì】2：该系列试剂盒均【jun1】经过大量的保【bǎo】守性【xìng】及特异【yì】性实验验证，凭借【jiè】公司拥有的丰富的菌种资源【yuán】，每一种检【jiǎn】测试剂盒均【jun1】经【jīng】过了20余种标准菌株和临【lín】床菌株的保守性【xìng】验证及40余种【zhǒng】近缘标准菌株和【hé】临床【chuáng】菌株的特【tè】异性验证，确保在使【shǐ】用过程【chéng】中不会【huì】出现【xiàn】任何的假阳性及假阴性报告结【jié】果。

使用方法：

注：所【suǒ】有【yǒu】试剂【jì】使用前需*解冻，混合均匀，6,000rpm离【lí】心数秒后使用【yòng】。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样本的【de】核酸提取可【kě】采用病毒RNA提取试剂【jì】盒【hé】或自动化核酸提【tí】取【qǔ】仪等，具体提取【qǔ】方法请参照相关【guān】说明书。阳性质控【kòng】品【pǐn】及阴【yīn】性质控品无需提取，可直接使【shǐ】用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性【xìng】质控品+待检样本+阳性质【zhì】控【kòng】品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液【yè】、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装【zhuāng】20 μl至单个PCR反【fǎn】应管【guǎn】)。组分每头份用量FMD  RT-PCR反【fǎn】应【yīng】液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心【xīn】30s，转移【yí】至样【yàng】本处【chù】理区。

2.木霉属通用PCR检测试剂盒加样（样本处理区）

3.在上述的PCR反应管中分别加入【rù】待检样本RNA提取物、阴性质控品【pǐn】和阳性质控【kòng】品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离【lí】心10s，转移【yí】至扩增区。