泌尿道致病性大肠杆菌PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：泌尿道致病性大肠杆菌PCR检测试剂盒

英文【wén】名称：Uropathogenic Escherichia coli（UPEC）PCR

组成及试剂配制:

1、 酶标板：一块（96孔）

2、 标【biāo】准品【pǐn】（冻干品）： 2瓶【píng】，请【qǐng】临用前15分【fèn】钟内【nèi】配制。每瓶以【yǐ】样【yàng】品稀释液稀释至0.5ml，盖好后【hòu】室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓【cuō】动以【yǐ】助溶解，其浓度为【wéi】200 U/L，然后【hòu】做系列倍比稀释（注：不要直接在【zài】板中进行倍比【bǐ】稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀【xī】释液【yè】直接【jiē】作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取【qǔ】0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述【shù】标准【zhǔn】品加【jiā】入含有0.3ml样品【pǐn】稀释液的【de】Eppendorf管中，混匀【yún】即【jí】可，其余【yú】浓度【dù】以【yǐ】此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：

1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集。

2、泌尿道致病性大肠杆菌PCR检测试剂盒存放：样【yàng】本【běn】在2~8℃条件下【xià】保存应不超【chāo】过72h，-70℃以下可长期保存【cún】，但应【yīng】避【bì】免反复冻融（zui多冻融【róng】3次）。

3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。

特点优势：

1.特异性：所有产品使用的引物均经过【guò】详【xiáng】尽【jìn】的生物信息【xī】学分【fèn】析【xī】，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用【yòng】的每一条引物【wù】均为【wéi】种属或【huò】血清型【xíng】特异的基因序【xù】列区段，可实【shí】现对【duì】种属及血【xuè】清型的特异检【jiǎn】测，特异性均达到100%。

2.重现【xiàn】性：该系列所有产品【pǐn】均【jun1】经过大【dà】量实【shí】验菌【jun1】株的验证，重现性为100%。

3.灵敏性：该系【xì】列产品【pǐn】可实现对【duì】检测菌的高灵敏【mǐn】检测，当样【yàng】品中的浓【nóng】度达到103cfu/ml时，可实现对其的直【zhí】接【jiē】检测，无需繁琐的增菌过程。

4.实用性：检测【cè】范围广，涵【hán】盖了对人【rén】体【tǐ】危害较为严重【chóng】的17种呼吸道【dào】及肠道【dào】致【zhì】病【bìng】菌，可实现对临床样品及其他【tā】环境取样的快速检测，整【zhěng】个检测过程为【wéi】9-21个小时【shí】。

5.优【yōu】势1：序列【liè】资源【yuán】丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破【pò】译，从理论上保证所选【xuǎn】引物具有良好【hǎo】的保守性和【hé】特【tè】异性。

6.优势【shì】2：该系列试【shì】剂盒均经过大量【liàng】的保守性及特【tè】异【yì】性实验验证【zhèng】，凭【píng】借公司【sī】拥有的丰富的菌种【zhǒng】资源，每一种检测【cè】试剂盒均经过了20余种标准【zhǔn】菌株和临床菌株的保守性【xìng】验证及40余种近【jìn】缘【yuán】标准菌株和临床菌株【zhū】的特异【yì】性验【yàn】证【zhèng】，确保在使用过程中【zhōng】不会出现任何的【de】假阳性【xìng】及假阴性报告结【jié】果。

使用方法：

注：所【suǒ】有试剂使【shǐ】用前需*解冻，混合均匀，6,000rpm离心【xīn】数秒后使用。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样本的核酸提取可采用病毒【dú】RNA提取试【shì】剂盒或自动【dòng】化【huà】核【hé】酸提【tí】取仪等，具体提取方法请参照相关【guān】说明书【shū】。阳【yáng】性质控品【pǐn】及阴性【xìng】质控【kòng】品无需提取，可直接使【shǐ】用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性质【zhì】控品+待检【jiǎn】样本+阳性质控品）PCR反应管，每【měi】管分别加入【rù】FMD RT-PCR反应【yīng】液【yè】19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应【yīng】液【yè】、RT-PCR酶所需【xū】总量【liàng】，两者混【hún】匀离【lí】心【xīn】后分装20 μl至单个PCR反应管)。组分每头份用【yòng】量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所有【yǒu】PCR反应管于【yú】6,000rpm离心30s，转移至样本【běn】处理区。

2.泌尿道致病性大肠杆菌PCR检测试剂盒加样（样本处理区）

3.在上【shàng】述的PCR反应管中分别【bié】加入待检样本RNA提取【qǔ】物、阴性质控【kòng】品和阳性质控品各5 μl，盖紧【jǐn】管盖【gài】，于6,000rpm离【lí】心【xīn】10s，转移至扩【kuò】增区。