马sheng殖泰勒氏菌PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：马sheng殖泰勒氏菌PCR检测试剂盒

英【yīng】文名称【chēng】：Taylorella equigenitalisPCR

准备物品：

清理液（A）                                   毫升【shēng】

染色【sè】液【yè】（t B）                                 微升

稀【xī】释液（C）                                   毫升

溶【róng】解液（tD）                                  毫升

产【chǎn】品【pǐn】说明书                                     1份

注意事项：

1．基础程序。

2．扩增温度和延伸温度。

3．反应时间。

4．循环次数。

5．PCR 反应液的配制。

6．PCR技术的基本原理。

7．PCR的反应动力学。

8．PCR扩增产物。

9．PCR反应体系与反应条件。

反应五要素：

参加PCR反【fǎn】应【yīng】的物质主要有五种即引物【wù】、酶、dNTP、模板【bǎn】和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，马sheng殖泰勒氏菌PCR检测试剂盒PCR 产物的特异性取【qǔ】决于引【yǐn】物与模【mó】板DNA互补的程度。理论上【shàng】，只要【yào】知道任何一段模【mó】板【bǎn】DNA序列， 就能按其设计互补的【de】寡核苷酸链做引【yǐn】物，利用PCR就可将模板DNA在体外大【dà】量扩增。设计【jì】引物【wù】应遵【zūn】循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增【zēng】跨度： 以【yǐ】200-500bp为宜，特定条件下可扩增长【zhǎng】至10kb的【de】片段。

③引物碱基：G+C含【hán】量【liàng】以9-22%为宜，G+C太少扩【kuò】增效果不【bú】佳，G+C过多易出【chū】现非【fēi】特异条带。ATGC*随机分布，避免5个【gè】以【yǐ】上【shàng】的【de】嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级【jí】结构，避【bì】免两【liǎng】条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物【wù】二聚体，产生非【fēi】特异【yì】的扩增条【tiáo】带。

⑤引物3'端的碱基，特【tè】别【bié】是末及【jí】倒数第【dì】二个碱【jiǎn】基，应严格要求配对，以【yǐ】避免因末【mò】端碱【jiǎn】基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或【huò】能加上合【hé】适的酶切位【wèi】点【diǎn】， 被【bèi】扩【kuò】增的靶序列*有适宜的酶【méi】切位点【diǎn】， 这对酶切分析或分子【zǐ】克隆很有好处【chù】。

⑦引【yǐn】物的【de】特异【yì】性：引【yǐn】物【wù】应与核酸序列数【shù】据库的其它序列无明显同源性。

引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量【liàng】产生所需要的结果为好，引物浓度偏【piān】高【gāo】会【huì】引起错配和非特【tè】异【yì】性扩增【zēng】，且可增【zēng】加引物之间【jiān】形成二聚体【tǐ】的机会。