ru房链球菌PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：ru房链球菌PCR检测试剂盒

英文名称：Streptococcus uberisPCR

准备物品：

清理【lǐ】液（A）                                   毫升【shēng】

染色液（t B）                                 微升

稀释【shì】液（C）                                   毫升【shēng】

溶解液【yè】（tD）                                  毫升

产品【pǐn】说【shuō】明书                                     1份

注意事项：

1．基础程序。

2．扩增温度和延伸温度。

3．反应时间。

4．循环次数。

5．PCR 反应液的配制。

6．PCR技术的基本原理。

7．PCR的反应动力学。

8．PCR扩增产物。

9．PCR反应体系与反应条件。

反应五要素：

参加PCR反【fǎn】应的【de】物质主要【yào】有五种即引物、酶【méi】、dNTP、模【mó】板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，ru房链球菌PCR检测试剂盒PCR 产物的特异性取决于【yú】引物与模板DNA互补的程度。理【lǐ】论【lùn】上，只要知道任何一段模板DNA序列【liè】， 就能按其设计【jì】互补的寡核苷酸链【liàn】做引物【wù】，利用PCR就【jiù】可将模板DNA在体外大【dà】量扩增【zēng】。设计【jì】引物应【yīng】遵循以【yǐ】下原则【zé】：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度【dù】： 以200-500bp为宜，特定条【tiáo】件【jiàn】下可扩增长【zhǎng】至【zhì】10kb的【de】片段。

③引物碱【jiǎn】基：G+C含【hán】量以9-23%为宜，G+C太【tài】少扩增效果不佳，G+C过多易出现非【fēi】特【tè】异条带。ATGC*随机分布【bù】，避免5个以上的嘌呤【lìng】或嘧【mì】啶核【hé】苷酸的成串排列。

④避免引物内部【bù】出现【xiàn】二级结构，避免两条【tiáo】引物间互【hù】补，特别是3'端的互补，否则【zé】会形【xíng】成引物二【èr】聚体，产生非特异的扩增条带【dài】。

⑤引【yǐn】物3'端的碱基，特别是【shì】末及倒【dǎo】数第二个【gè】碱基，应严【yán】格要求配对【duì】，以避免因末端碱基不配对而导【dǎo】致PCR失败【bài】。

⑥引物中有【yǒu】或能【néng】加上合适的酶切位点， 被扩增的【de】靶序列【liè】*有适宜的【de】酶【méi】切【qiē】位点， 这对酶切分析或分子克隆【lóng】很有好处。

⑦引物的特异性：引【yǐn】物应【yīng】与核酸序列数据库的【de】其它序【xù】列无明显【xiǎn】同源【yuán】性。

引物量：每条引【yǐn】物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引【yǐn】物量产生所需要【yào】的结果为好，引【yǐn】物浓度【dù】偏【piān】高【gāo】会引起错【cuò】配和非特【tè】异性扩增，且可增加引【yǐn】物之【zhī】间形【xíng】成二聚体的机会。