日本血吸虫PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：日本血吸虫PCR检测试剂盒

英文名称：Schistosoma japonicumPCR

准备物品：

清【qīng】理液【yè】（A）                                   毫升

染色液【yè】（t B）                                 微【wēi】升

稀释【shì】液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                  毫升

产品说明【míng】书                                     1份【fèn】

注意事项：

1．基础程序。

2．扩增温度和延伸温度。

3．反应时间。

4．循环次数。

5．PCR 反应液的配制。

6．PCR技术的基本原理。

7．PCR的反应动力学。

8．PCR扩增产物。

9．PCR反应体系与反应条件。

反应五要素：

参加PCR反应的物质【zhì】主要有【yǒu】五种【zhǒng】即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物【wù】：引物是PCR特异【yì】性反应的【de】关【guān】键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度【dù】。日本血吸虫PCR检测试剂盒理论上，只【zhī】要知【zhī】道任何一段模板【bǎn】DNA序列， 就能【néng】按【àn】其设计互补的寡核苷酸链【liàn】做引物，利用PCR就可将【jiāng】模【mó】板DNA在【zài】体【tǐ】外大量扩增。设计引物应【yīng】遵循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨【kuà】度： 以200-500bp为【wéi】宜【yí】，特定条件下可扩增长【zhǎng】至【zhì】10kb的片段【duàn】。

③引物碱基：G+C含量【liàng】以9-22%为宜，G+C太少扩增效果【guǒ】不佳，G+C过多易出现非【fēi】特异条带。ATGC*随机分布【bù】，避【bì】免5个以【yǐ】上的嘌【piào】呤或嘧啶核苷【gān】酸的成【chéng】串排列。

④避免引【yǐn】物内【nèi】部出【chū】现二级结【jié】构，避免两条引物间互【hù】补，特【tè】别【bié】是3'端的【de】互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基，特【tè】别是末【mò】及倒数第【dì】二个碱基，应【yīng】严【yán】格【gé】要【yào】求配对，以避免因末端碱基不配对【duì】而导致PCR失败。

⑥引物中【zhōng】有或能【néng】加【jiā】上合适的酶【méi】切位点【diǎn】， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点【diǎn】， 这对酶切分【fèn】析或分子克隆很有【yǒu】好处。

⑦引物的特异【yì】性：引物应【yīng】与核酸序列数据【jù】库【kù】的其它序列无【wú】明显同源性。

引物【wù】量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量【liàng】产生所需【xū】要的结【jié】果为好【hǎo】，引物浓【nóng】度偏高会引起错配和非【fēi】特【tè】异性扩增，且可增【zēng】加引物之间形成【chéng】二聚体的机会【huì】。