普氏立克次氏体PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：普氏立克次氏体PCR检测试剂盒

英文名称：Rickettsia prowazekiiPCR

组成及试剂配制:

1、 酶标板：一块（96孔）

2、 标【biāo】准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟【zhōng】内配制。每【měi】瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动【dòng】以助溶解，其浓【nóng】度为200 U/L，然后做系【xì】列倍【bèi】比【bǐ】稀【xī】释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别【bié】配【pèi】制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样【yàng】品稀【xī】释液直【zhí】接作为空【kōng】白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取【qǔ】0.3ml （不【bú】要少于0.3ml ）200 U/L的上【shàng】述标准品加入含有【yǒu】0.3ml样品稀释液的【de】Eppendorf管中【zhōng】，混【hún】匀【yún】即可，其【qí】余浓度以此【cǐ】类【lèi】推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：

1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集；

2、普氏立克次氏体PCR检测试剂盒存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过【guò】72h，-70℃以【yǐ】下可长期保【bǎo】存【cún】，但应避免反【fǎn】复冻融（zui多冻【dòng】融3次）；

3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。

特点优势：

1.特异性：所有产【chǎn】品使用的引物均经过详【xiáng】尽的生物【wù】信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比【bǐ】对，确保【bǎo】所用的每一【yī】条引物均为【wéi】种属或血清型【xíng】特异的基【jī】因序列区段，可【kě】实现对【duì】种属【shǔ】及血清型的特异检测【cè】，特异【yì】性均【jun1】达【dá】到100%。

2.重现性：该系列所有产品【pǐn】均【jun1】经过大量实【shí】验菌株的验证【zhèng】，重【chóng】现性为100%。

3.灵敏性：该系【xì】列产品可【kě】实现对检【jiǎn】测菌的高灵敏检测，当【dāng】样品中【zhōng】的【de】浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直【zhí】接检测，无需繁【fán】琐的增菌过程。

4.实用性：检测【cè】范围广，涵盖了对人体危【wēi】害较为严【yán】重的17种呼【hū】吸道及【jí】肠【cháng】道致病【bìng】菌，可实现对临床样【yàng】品及其【qí】他环境取【qǔ】样【yàng】的快速检测，整个检测过程为9-22个小时。

5.优势1：序列资源丰富【fù】，除GenBank公【gōng】布的序列外，公司还进行了大量菌株的【de】序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保【bǎo】守性和特异【yì】性。

6.优势2：该系列试剂盒【hé】均【jun1】经【jīng】过大【dà】量的保守性及特异性实验验【yàn】证【zhèng】，凭借公司拥【yōng】有的丰富【fù】的菌种资源，每【měi】一种检测试【shì】剂【jì】盒【hé】均经过了20余种标准【zhǔn】菌株和临床菌株的保守性【xìng】验证及40余种【zhǒng】近【jìn】缘标准菌【jun1】株和临床菌株的特异性验证，确【què】保在使用过程中不会出【chū】现【xiàn】任何的假阳性及【jí】假阴性报告结果。

使用方法：

注：所有试剂使用前需*解【jiě】冻【dòng】，混【hún】合均匀【yún】，6,000rpm离心数秒后使用。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样本的核酸提取可采【cǎi】用病毒RNA提取试剂【jì】盒或自动化核酸提取【qǔ】仪等，具【jù】体提取【qǔ】方法请参照【zhào】相关说明书；阳性质控品【pǐn】及【jí】阴性【xìng】质控【kòng】品无需【xū】提【tí】取，可直【zhí】接使用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个【gè】（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品【pǐn】）PCR反应管，每管分【fèn】别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据【jù】每头份用量【liàng】计算N+1份FMD RT-PCR反【fǎn】应【yīng】液、RT-PCR酶所需总【zǒng】量，两【liǎng】者混匀离【lí】心【xīn】后分装20 μl至【zhì】单个PCR反应【yīng】管)。组分【fèn】每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

1 .普氏立克次氏体PCR检测试剂盒将所有PCR反【fǎn】应【yīng】管于【yú】6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。

2.加样（样本处理区）

3.在上述的PCR反应管【guǎn】中【zhōng】分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控【kòng】品和阳【yáng】性质控品各5 μl，盖紧管【guǎn】盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩【kuò】增【zēng】区【qū】。