气管比翼线虫PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：气管比翼线虫PCR检测试剂盒

英文名称：Syngamus tracheaPCR

准备物品：

清理液（A）                                   毫升

染【rǎn】色液（t B）                                 微升

稀释液（C）                                   毫【háo】升

溶解【jiě】液（tD）                                  毫升

产品说明【míng】书                                     1份【fèn】

注意事项：

1．基础程序。

2．扩增温度和延伸温度。

3．反应时间。

4．循环次数。

5．PCR 反应液的配制。

6．PCR技术的基本原理。

7．PCR的反应动力学。

8．PCR扩增产物。

9．PCR反应体系与反应条件。

反应五要素：

参【cān】加PCR反应的物质主要有【yǒu】五种即【jí】引【yǐn】物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，气管比翼线虫PCR检测试剂盒PCR 产物【wù】的特异【yì】性取决于引物【wù】与模板DNA互补的程度。理论上【shàng】，只要知【zhī】道任何一段模板DNA序列， 就能按其【qí】设【shè】计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模【mó】板【bǎn】DNA在体【tǐ】外大量扩增。设【shè】计引物应遵循【xún】以【yǐ】下原则【zé】：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增【zēng】长至10kb的片【piàn】段【duàn】。

③引物碱【jiǎn】基：G+C含【hán】量以【yǐ】9-22%为【wéi】宜【yí】，G+C太少【shǎo】扩增效【xiào】果不佳，G+C过多【duō】易出现非特异【yì】条带。ATGC*随机分布，避免5个以【yǐ】上的嘌呤或嘧【mì】啶核苷酸的成串排列。

④避【bì】免引物内部【bù】出现二级结构【gòu】，避免两条【tiáo】引物间【jiān】互补，特别是3'端【duān】的互补【bǔ】，否则会形成【chéng】引物二聚体，产【chǎn】生非特异的【de】扩增条带。

⑤引物3'端的碱基，特别是末及【jí】倒【dǎo】数第二个碱基，应严【yán】格要求配对【duì】，以避免因末端碱基不配对而导致【zhì】PCR失【shī】败【bài】。

⑥引物中有或能【néng】加上合适【shì】的酶【méi】切位点【diǎn】， 被扩增的【de】靶序列【liè】*有适宜的酶切位点， 这对酶切分【fèn】析或分子克隆很有好处【chù】。

⑦引物的特【tè】异【yì】性：引【yǐn】物应与【yǔ】核酸序列数据库的【de】其它序列无明显同【tóng】源性。

引物量：每【měi】条引物的浓度【dù】0.1～1umol或10～100pmol，以【yǐ】*引物量产生所需要的结果为好【hǎo】，引【yǐn】物浓度【dù】偏高会【huì】引起错配和非特【tè】异性扩增，且可增加引物之间形成【chéng】二聚体的机会。