大鼠β2GP1GELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 β2GP1G ELISA试剂盒（酶联检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试【shì】剂【jì】取出放【fàng】置【zhì】30分钟，平衡【héng】至室【shì】温，所有标准品和样品必【bì】需设置平行对照实验，快速加入试剂至样品中【zhōng】，立即漩涡震荡2秒混【hún】匀【yún】。

1. 依据实验键盘纸决定酶标【biāo】条的使用量，将剩余【yú】的酶标条连同干燥剂一【yī】起【qǐ】放【fàng】回密封【fēng】塑【sù】料袋，密封【fēng】，4℃保存。

2. 移【yí】取50μL中和【hé】液至各个微【wēi】孔中【zhōng】，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结【jié】合【hé】)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶至各孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

8. 移取50μL 抗体【tǐ】工作液【yè】至【zhì】各孔中，除了TA（全活【huó】性【xìng】）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标孔置【zhì】于【yú】孔板振动器上，250~500rpm，室温孵育【yù】2小【xiǎo】时。

10. 在吸水【shuǐ】纸上拍干微孔内溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次【cì】，每【měi】次需拍【pāi】干。

11. 后一次洗涤，清空各微【wēi】孔，在干净的无尘【chén】吸水纸上轻巧【qiǎo】酶【méi】标板数【shù】次，以【yǐ】确保【bǎo】没有洗涤液残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液【yè】，于室温静【jìng】置5~30分钟。（显色底物A和B需【xū】在临用前15分【fèn】钟内等【děng】体积混合，并避【bì】光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白）孔值【zhí】，读取450nm处的光密度值，在570nm至【zhì】590nm之间好有【yǒu】修正，如【rú】果酶标仪不能自动清除Blank(空白)孔值【zhí】，那么手动扣【kòu】除每个【gè】读数的Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂【jì】盒时，应将各种【zhǒng】试【shì】剂管离【lí】心【xīn】数分钟，以便试剂【jì】集中到管【guǎn】底。

2. 每【měi】次实验留一孔【kǒng】作为空白调零【líng】孔，该孔不加任【rèn】何试【shì】剂，只是【shì】zui后加底物溶液及2N H2SO4，测【cè】量时先用此孔调OD值【zhí】至【zhì】零。

3. 为防止【zhǐ】样品蒸发，试验时将反【fǎn】应板放于铺【pù】有湿布【bù】的【de】密闭盒内，酶标板【bǎn】加上盖或覆膜。

4. 未使用完【wán】的【de】酶标板【bǎn】或者试剂，请于9-22℃保存，标准品、生物-素标记抗体【tǐ】工【gōng】作液、辣根过氧化【huà】物酶标记亲【qīn】和素工作液请依据所需的【de】量配置使用【yòng】，请【qǐng】勿重复使用已【yǐ】稀释过的标准品、生物-素标记抗体工【gōng】作液或、辣根过氧化【huà】物酶【méi】标记亲和【hé】素工作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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