大鼠β2GP1MELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 β2GP1M ELISA试剂盒（酶联检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用【yòng】前将各【gè】种试剂取出放置30分钟【zhōng】，平【píng】衡至室温【wēn】，所有标【biāo】准品和【hé】样品必需【xū】设置平行对照实验，快速加入试剂至样品中，立【lì】即漩【xuán】涡震【zhèn】荡2秒混匀。

1. 依据【jù】实验键盘纸决定酶标条的【de】使用量，将剩【shèng】余的酶【méi】标【biāo】条连同干燥剂一【yī】起放回密封塑料袋，密封，4℃保【bǎo】存【cún】。

2. 移取【qǔ】50μL中和液至各个【gè】微孔【kǒng】中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结【jié】合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合【hé】）孔【kǒng】。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除了【le】TA（全【quán】活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔【kǒng】。

8. 移取【qǔ】50μL 抗体工作液至【zhì】各孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白【bái】）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置【zhì】于孔板振动器上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水纸上拍干【gàn】微孔内溶液，加洗涤【dí】液400μL每孔洗3次【cì】，每次需【xū】拍干【gàn】。

11. 后一次洗【xǐ】涤【dí】，清空各微孔，在干【gàn】净的无尘【chén】吸水纸上轻巧酶【méi】标【biāo】板数【shù】次，以确保没有洗涤液残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室【shì】温【wēn】静置【zhì】5~30分【fèn】钟。（显色底物A和B需在临用【yòng】前15分【fèn】钟内等体【tǐ】积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪【yí】Blank（空白）孔值【zhí】，读取【qǔ】450nm处的【de】光【guāng】密度值，在570nm至590nm之间好有修【xiū】正，如果酶【méi】标仪不能自【zì】动清除Blank(空【kōng】白)孔值，那么手动扣除【chú】每【měi】个读数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初【chū】次使用【yòng】试剂【jì】盒时，应将各【gè】种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底【dǐ】。

2. 每次实验留一孔【kǒng】作为【wéi】空白调零孔，该孔不加任何试剂【jì】，只是【shì】zui后加【jiā】底物溶液【yè】及【jí】2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值至零。

3. 为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有【yǒu】湿布【bù】的【de】密【mì】闭盒内，酶标板【bǎn】加上盖【gài】或覆膜。

4. 未使【shǐ】用完【wán】的酶标板或者试剂，请于9-22℃保存，标准品、生物-素标记抗【kàng】体工作液、辣根过氧化物酶标记亲【qīn】和素工作【zuò】液请【qǐng】依据所需的【de】量配置使【shǐ】用，请勿重复【fù】使用已稀释过的标准【zhǔn】品【pǐn】、生物-素标记抗体【tǐ】工作【zuò】液或、辣根过【guò】氧【yǎng】化物酶标【biāo】记【jì】亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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