人结肠腺癌细胞（SW1116）

人结肠腺癌细胞(SW1116)
细胞介绍：
CSAp阴性【xìng】(CSAp-)。结肠抗原3，阴性。角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性【xìng】。癌基 因c-myc, K-ras, H-ras, myb, sis和fos的【de】表【biǎo】达呈阳性。未检测【cè】到癌基因N-myc和N-ras的表达【dá】。表达肿瘤特异的核基质蛋白CC-4，CC-5和CC-6。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.L-15培养【yǎng】基(GIBC0)，90%;胎【tāi】牛血清，10%。培养条件【jiàn】:气相：空气，100%。温度：37摄氏【shì】度。
2.冻存液【yè】：90%*培养基，10%DMSO,现用【yòng】现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞：将含【hán】有lmL细胞【bāo】悬液的冻【dòng】存管在37°C水【shuǐ】浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条【tiáo】件【jiàn】下离心4分【fèn】钟【zhōng】，弃去上【shàng】清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬【xuán】液【yè】加入培养瓶中【zhōng】培养过夜【yè】（或将细胞【bāo】悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养【yǎng】基，培养过夜）。第二天【tiān】换液并【bìng】检查细胞【bāo】密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人结肠腺癌细胞(SW1116)对于【yú】贴壁细胞【bāo】，传代可参考【kǎo】以【yǐ】下方法：弃去培养上清，用不含【hán】钙、镁离子【zǐ】的【de】PBS润洗【xǐ】细【xì】胞9-21次【cì】。力【lì】口2m丨消化（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养箱【xiāng】中消化9-21分钟，然后在显【xiǎn】微镜下观察细【xì】胞消化情况，若【ruò】细胞大部分变圆并脱【tuō】落，迅【xùn】速【sù】拿回【huí】操作台【tái】，轻敲几下培【péi】养瓶后加【jiā】少量【liàng】培养【yǎng】基终止消【xiāo】化。按6-8ml/瓶补【bǔ】加培养基，轻轻【qīng】打匀后吸出，在1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液后【hòu】吹匀。将细【xì】胞悬液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中【zhōng】。
 
细胞冻【dòng】存【cún】：待细胞生长状【zhuàng】态良好时，可进行细【xì】胞冻存。贴【tiē】壁细胞冻【dòng】存时，弃去培养基后【hòu】加入少量胰酶，细胞变圆【yuán】脱落后【hòu】，加入约lml含血【xuè】清的培养基后加【jiā】入【rù】冻存管中，再添加【jiā】1〇%DMSO后进行冻存【cún】。
  
注意事项：
收【shōu】到【dào】细胞【bāo】后，若【ruò】发现干冰己挥发干净、冻存【cún】管瓶盖脱落、破损及【jí】细胞有污染，请立即与我们电联。
所有动【dòng】物细胞均【jun1】视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全【quán】台【tái】内操作，并请注意防【fáng】护，所有废【fèi】液【yè】及接【jiē】触过此【cǐ】细胞的器皿需要灭菌后方【fāng】能【néng】丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：结肠腺癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人结肠腺癌细胞(SW1116)运输和【hé】保存【cún】：使用含有胎牛【niú】血【xuè】清的2ml冻存管【guǎn】发【fā】送存活细胞。收到细胞后， 可在1000RPM，常【cháng】温【wēn】条件【jiàn】下【xià】，离心5min后，于洁净【jìng】操【cāo】作台弃去上清，加入推荐 使【shǐ】用的培【péi】养基后转移至【zhì】l〇cm培养皿或【huò】者T75培养瓶中培养，传代达到细胞生长 状态良好时，再进行冻存【cún】。具体操作见细胞培养【yǎng】步骤。
细胞用途：仅供使用。