人舌鱗癌细胞（Tca-8113）

人舌鱗癌细胞(Tca-8113)
细胞介绍：
Tca-8113源自属于I级鳞癌(T2NlAmo, II stage)的原位舌癌的活组【zǔ】织检查切片。通【tōng】过干贴壁方【fāng】法建【jiàn】立于1987年，传代时【shí】间为38小时。传代第三天有丝分裂指【zhǐ】数为61%，移植效率【lǜ】为86%，软琼脂克【kè】隆率为9-21.7%。ATS处理后在【zài】ICR和C57B1
小鼠中成瘤。电镜和组化特征与鳞癌相符。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培【péi】养基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八, D-葡萄糖2.5g八，丙酮酸【suān】钠O.llg八【bā】)，80%;胎牛血清，20%。
2. 培养条件：气相：空【kōng】气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为【wéi】70%-80%。
3.冻存【cún】液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液氮【dàn】储存。
 
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将【jiāng】含有lmL细胞悬液的【de】冻存【cún】管【guǎn】在37°C水浴中迅速【sù】摇晃解冻，加入4mL培【péi】养基混合均【jun1】匀。在1000RPM条件下离心4分钟【zhōng】，弃去上清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将【jiāng】所有【yǒu】细胞悬液【yè】加入【rù】培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入l〇cm皿中，加【jiā】入约8ml培养基，培养【yǎng】过【guò】夜）。第二天换液并检查【chá】细胞密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人舌鱗癌细胞(Tca-8113)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去培养上清，用不含【hán】钙【gài】、镁【měi】离子的PBS润洗细胞【bāo】9-21次【cì】。力【lì】口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中，置于37°C培养箱中消【xiāo】化9-21分【fèn】钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞【bāo】大部【bù】分【fèn】变【biàn】圆【yuán】并【bìng】脱落，迅速【sù】拿回操作台，轻敲几【jǐ】下【xià】培养瓶后加【jiā】少量培养基【jī】终【zhōng】止消化。按6-8ml/瓶补加培养基，轻【qīng】轻打匀【yún】后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养【yǎng】液后吹【chuī】匀。将【jiāng】细胞悬液按1: 2到1: 5的比例【lì】分到新的含8ml培养基的【de】新皿中或者瓶中。
 
细胞冻存：待细胞生长状【zhuàng】态良【liáng】好时【shí】，可进行【háng】细胞冻存。贴壁细胞【bāo】冻存【cún】时【shí】，弃去培【péi】养基后加【jiā】入少量胰酶，细【xì】胞变圆脱落后，加入约lml含血清的培【péi】养基后【hòu】加入【rù】冻存管中，再添加【jiā】1〇%DMSO后进行【háng】冻存。
 
注意事项：
收【shōu】到细【xì】胞后，若发现【xiàn】干冰己【jǐ】挥发【fā】干净、冻存管瓶【píng】盖脱落、破损及【jí】细胞有污染，请【qǐng】立即与我们电联。
所有动物细胞【bāo】均视为有潜在的【de】生物危害【hài】性，必须在二【èr】级生物安全【quán】台内操作，并请【qǐng】注意【yì】防护，所有废液及接触【chù】过此【cǐ】细胞的器皿需要灭菌后方能【néng】丢【diū】弃。
 
细胞特性：
1)来源：舌癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人舌鱗癌细胞(Tca-8113)运输和保【bǎo】存：使用【yòng】含有胎牛血清的2ml冻【dòng】存管发送【sòng】存活细胞【bāo】。收到细胞后，可在1000RPM，常温【wēn】条件下，离心【xīn】5min后，于洁净操作台弃去上清【qīng】，加【jiā】入推荐使用的培养基后转移至l〇cm培养皿【mǐn】或者T75培养瓶中培养【yǎng】，传代达到细胞生长状态【tài】良【liáng】好【hǎo】时，再进【jìn】行冻存。具体操【cāo】作见【jiàn】细胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。