大鼠回肠细胞（IEC-18）

大鼠回肠细胞(IEC-18)
细胞介绍该细胞来源于大鼠肠上皮细胞。
细胞特性
1)来源：大鼠肠上皮
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微【wēi】镜下确【què】认细胞生长【zhǎng】状态，去掉【diào】封【fēng】口膜并将【jiāng】T25瓶置于37°C培养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如【rú】果细胞长满（90%以上）请【qǐng】及时进行细【xì】胞传代，传代培养【yǎng】用6ml本【běn】公司附带的*培养基。
5.接到细胞次日，请检查【chá】细胞是否污【wū】染，若发现污染【rǎn】或疑似污染【rǎn】，请及时【shí】与我们取得电联。
 
大鼠回肠细胞(IEC-18)细胞用途：
仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】DMEM培养基【jī】(DMEM，GIBCO)，95%;胎牛【niú】血清，5%，添【tiān】加0.1U/ml胰岛素【sù】。
2. 培养条件：气【qì】相：空气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培养【yǎng】箱【xiāng】湿度为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管迅速放入37°C水浴中（水【shuǐ】面要【yào】低于冻存管盖部【bù】）摇晃解冻，移入事先准备好的【de】含【hán】有4mL培养基【jī】的15ml离心管【guǎn】中【zhōng】混合均【jun1】匀。在1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃去【qù】上清液，加入lmL培【péi】养基后吹【chuī】匀。然【rán】后将所有细胞悬液移【yí】入含【hán】有5ml培养基的培养瓶【píng】中培养【yǎng】过夜。第【dì】二天换液并检查【chá】细胞密【mì】度。
 
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可【kě】参考以下方法：弃去【qù】培养【yǎng】上清，用不【bú】含钙、镁离子的PBS润【rùn】洗细【xì】胞9-21次。 力【lì】口 2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶【píng】中，置于37°C培养箱中消化【huà】9-21分钟【zhōng】，然后在显【xiǎn】微镜【jìng】下观察细胞消化情况，若细胞大部【bù】分变圆并脱落，迅速【sù】拿回作台，轻【qīng】敲几下培养瓶后加入3ml此细【xì】胞【bāo】的培【péi】养基终止消化。轻【qīng】轻【qīng】吹打后【hòu】吸【xī】出，移入15ml离【lí】心【xīn】管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清【qīng】液【yè】，加入【rù】lmL培养液后吹匀【yún】。移入到事先准备【bèi】好的含有5ml培【péi】养基的T-25培养【yǎng】瓶中或含有14ml培养基的T-75培养【yǎng】瓶中培养【yǎng】。
 
细胞冻存：
待细胞生长【zhǎng】状态良好【hǎo】时【shí】，可进行细胞冻存。贴壁【bì】细胞冻存【cún】时，先要消化处理并进行细胞计数【shù】。消化【huà】方法【fǎ】按照细胞传【chuán】代方法的【de】9-21步【bù】骤进行，后的重悬液使用【yòng】血【xuè】清。悬浮细胞直【zhí】接【jiē】计数后【hòu】离心，用血【xuè】清重悬浮，加【jiā】DMSO至终浓度【dù】为10%。加入DMSO后迅速混【hún】匀，按每lml的数量分【fèn】配到冻存管中。本公司按每个冻存管细【xì】胞数目大于【yú】1X106个细【xì】胞冻存。
 
大鼠回肠细胞(IEC-18)注意事项：
收【shōu】到细【xì】胞【bāo】后，若【ruò】发现干【gàn】冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即【jí】与我们电联。
所有动物细胞均视为【wéi】有潜在【zài】的生物【wù】危害性，必【bì】须在二【èr】级生物安【ān】全台内操【cāo】作，并请注【zhù】意防【fáng】护【hù】，所有废液及接触【chù】过此细胞的器皿需要灭【miè】菌后方能丢弃。