大鼠胰岛0细胞瘤细胞（RIN-m5F）

大鼠胰岛0细胞瘤细胞(RIN-m5F)
细胞介绍
该细胞是大鼠胰岛细【xì】胞RIN-m的克隆【lóng】，分【fèn】泌胰【yí】岛【dǎo】素及L型多巴脱羧【suō】酶，不产【chǎn】生生长激素【sù】抑制激素。
 
细胞特性
1)来源：大鼠，胰岛
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保【bǎo】存：使用T25瓶充液发送活【huó】细胞【bāo】。收到细胞后，请先在【zài】显微【wēi】镜下【xià】检查细胞生长【zhǎng】状态，并将T25瓶置于培养【yǎng】箱【xiāng】约6h或【huò】过夜后【hòu】，再次检查细胞状态【tài】。若状态良好，可【kě】进行细胞后续处【chù】理操作，按照以下方【fāng】式进行。若【ruò】发现可疑污染物，请及时与我们取【qǔ】得【dé】电联。
 
大鼠胰岛0细胞瘤细胞(RIN-m5F)细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO，添加【jiā】 NaHC031.5g八,D-葡萄糖2.5g八，丙酮酸钠O.llg八)，90%;胎牛【niú】血清，10%。
2.培养条件：气相：空【kōng】气，95%;二【èr】氧化碳，5%。温【wēn】度：37摄氏【shì】度，培养箱湿度为【wéi】70%-80%。
3.冻存液：90%*培【péi】养【yǎng】基，10%DMSO,现用【yòng】现配。液【yè】氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细【xì】胞悬液的【de】冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合【hé】均【jun1】匀。在【zài】1000RPM条件下【xià】离【lí】心4分【fèn】钟，弃【qì】去上【shàng】清【qīng】液，补加【jiā】l-2mL培养基后吹匀。然后【hòu】将所有细胞悬液加入培养瓶中【zhōng】培【péi】养过夜（或将【jiāng】
细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养基【jī】，培养【yǎng】过【guò】夜）。第二天换液并检【jiǎn】查细胞密度【dù】。
 
细胞【bāo】传代【dài】：如果细胞【bāo】密度达【dá】80%-90%，即可进行传代培养。弃去【qù】培【péi】养上清【qīng】，用不含钙、镁离【lí】子的PBS润洗细胞9-21次。力【lì】口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置【zhì】于37°C培【péi】养箱中消【xiāo】化9-21分钟【zhōng】，然后在显微镜下观察细胞【bāo】消化【huà】情况，若细胞大【dà】部【bù】分【fèn】变【biàn】圆并【bìng】脱【tuō】落，迅速拿回【huí】操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。按6-8ml/瓶补加【jiā】培【péi】养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养【yǎng】液后吹匀【yún】。 将细胞悬液按【àn】1: 2到1: 5的【de】比【bǐ】例分到新的含8ml培养基的新皿【mǐn】中或者瓶【píng】中。
 
细胞冻【dòng】存：待细胞生长状态良好时，可【kě】进行【háng】细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃【qì】去培养基【jī】后加入少【shǎo】量胰酶，细胞变【biàn】圆脱【tuō】落后【hòu】，加入约lml含血清【qīng】的培【péi】养基后加入冻存管【guǎn】中【zhōng】，再添加1〇%DMSO后【hòu】进行冻存。
 
大鼠胰岛0细胞瘤细胞(RIN-m5F)注意事项：
收【shōu】到细胞后，若发现【xiàn】干【gàn】冰【bīng】己【jǐ】挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我【wǒ】们电联。所有动物细胞均视为有潜在的生物【wù】危害性，必【bì】须在二【èr】级生物安全台内操作，并请注【zhù】意防护，所有【yǒu】废液及接触过【guò】此细胞【bāo】的【de】器皿需要灭菌后方【fāng】能【néng】丢弃【qì】。