大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（低分化）PC-12

大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（低分化）PC-12
细胞介绍：
该细胞【bāo】系来自能【néng】移【yí】植的雄性大鼠肾上腺嗜【shì】铬细【xì】胞瘤。这些【xiē】细【xì】胞表达【dá】神经生长因子(NGF)受体。NGF可诱导产生【shēng】神【shén】经表型。这些【xiē】细胞【bāo】不合成肾上腺素。
  
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养【yǎng】基(RPMI-1640:GIBCO)，85%;马【mǎ】血清【qīng】 10%胎牛血清5%。
2.培养条件：气【qì】相：空气，95%;二氧化碳【tàn】，5%。温度：37摄【shè】氏度，培养【yǎng】箱【xiāng】湿度为【wéi】70%-80%。
3.冻存【cún】液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配【pèi】。液氮储存。
2)细胞处理：
复【fù】苏细【xì】胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管【guǎn】在37°C水浴中迅速摇晃解冻【dòng】，入4mL培【péi】养【yǎng】基【jī】混合均匀【yún】。在1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃去上清【qīng】液，补加l-2mL培养基后【hòu】吹匀。然后将所有细胞悬【xuán】液加【jiā】入培养瓶中培养过夜（或将【jiāng】细胞悬液加【jiā】入l〇cm皿中，加入约8ml培养基【jī】，培养过夜）。第二天换液【yè】并【bìng】检
查细胞密度。
细胞【bāo】传代：如果细胞【bāo】密度达80%-90%，即【jí】可进行传代培养。对于贴壁细胞，传【chuán】代可【kě】参考以下方法：弃去【qù】培养上【shàng】清，用不含钙【gài】、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。力口2m丨消化【huà】液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于【yú】37°C培养箱【xiāng】中消化【huà】9-21分钟，然后在【zài】显微镜【jìng】下【xià】观察细胞消化情【qíng】况，若细胞【bāo】大【dà】部分变圆并脱落【luò】，迅速拿回【huí】操作台，轻敲几下培养【yǎng】瓶后加【jiā】少量培养基终止消化【huà】。
按6-8ml/瓶补加培【péi】养基，轻轻打【dǎ】匀后吸【xī】出【chū】，在1000RPM条件下离心4分弃去【qù】上清【qīng】液，补加l-2mL培养液后吹匀。
将细胞【bāo】悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养【yǎng】基的新皿中或者瓶【píng】中。细胞冻存：待细胞生【shēng】长状态【tài】良好时，可进【jìn】行细胞冻【dòng】存。贴壁细胞冻存时【shí】，弃去培【péi】养基后加入少【shǎo】量胰【yí】酶，细胞变【biàn】圆脱【tuō】落后，加入约lml含血【xuè】清的培养基【jī】后
加入冻存管中，再添加1〇%DMSO后进行冻存。
  
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（低分化）PC-12注意事项：
收【shōu】到【dào】细胞后，若【ruò】发现干冰己挥发干净【jìng】、冻存管瓶盖脱落、破损【sǔn】及细【xì】胞有污染，请即与我们电联【lián】。
所有动物细胞均视为【wéi】有潜在的生物危害性，必须【xū】在二【èr】级生物【wù】安全台内操作，并【bìng】请【qǐng】注意【yì】防护，所有废液及接触过此【cǐ】细胞【bāo】的器【qì】皿需要灭菌后方【fāng】能丢弃。
  
细胞特性：
1)来源：肾上腺嗜铬细胞瘤
2)形态：多角形
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（低分化）PC-12运输【shū】和保存：使用含【hán】有胎【tāi】牛血清【qīng】的2ml冻【dòng】存管发送存【cún】活细【xì】胞。收到细胞后，可在【zài】1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上【shàng】清，加入【rù】推荐使用的培养基【jī】后转移至l〇cm培养皿【mǐn】或者T25培养【yǎng】瓶【píng】中培养【yǎng】，传代达【dá】到细胞生长状态【tài】良好时，再进行【háng】冻存【cún】。具体操作见细胞【bāo】培养步骤。细胞用途【tú】：仅供使用。