大鼠肺泡巨噬细胞（NR8383）

大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)
细胞介绍
NR8383(正常大鼠，1983年)来源于肺灌洗时【shí】的正【zhèng】常【cháng】大鼠肺泡巨噬细胞。细胞在gerbil肺【fèi】细【xì】胞连续培养液存在下培养了大约9-21个月。随后【hòu】，不再【zài】需要外源生长【zhǎng】因子。通过有限稀释法从单个细胞克隆并亚克隆NR8383细【xì】胞【bāo】，并【bìng】三次用【yòng】软琼脂亚【yà】克隆。细胞表【biǎo】现【xiàn】出【chū】巨噬细胞的【de】特性【xìng】，吞噬酵母【mǔ】多糖和【hé】铜绿，非特异性脂酶活性，Fc受体，氧化降解【jiě】；分泌IL-l,TGF-(3和IL-6,可重【chóng】复地响应外源生长因子【zǐ】。NR8383细胞【bāo】响应【yīng】博莱【lái】霉素，分泌【mì】TGF-0前体。在博【bó】莱【lái】霉【méi】素刺激下，TGF-(3mRNA表达也上升。细胞对【duì】内毒素敏【mǐn】感。9-21钠克/毫升的LPS水平抑制增生【shēng】达50%。即使【shǐ】达到0.001毫克/毫升的水平，LPS抑【yì】制还是无毒且在后续过程中可逆NR8383细胞株提供了高响应【yīng】的肺泡巨噬细胞的均一【yī】来源，可以用【yòng】于【yú】体外研究巨【jù】响细胞相关活性。
 
细胞特性
1)来源：肺；巨噬细胞
2)形态：巨噬细胞，半悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)细胞接受后的处理：
1)收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2)请先在显微【wēi】镜下确认【rèn】细【xì】胞生长状态【tài】，去掉封口膜并【bìng】将T25瓶置于37°C培养【yǎng】约2-3h〇
3)弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4) 如果细胞长满（90%以【yǐ】上）请及时进【jìn】行细胞传【chuán】代，传代培养用6ml本公司附带【dài】的【de】*培养【yǎng】基【jī】。
5)接到细胞次日，请【qǐng】检查细胞是否污【wū】染，若【ruò】发现污染【rǎn】或疑【yí】似污染【rǎn】，请及时与【yǔ】我们取得【dé】电联。
 
细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
 
一.培养基及培养冻存条件准备：
1.准备F-12K培养【yǎng】基（F-12K，GIBCO)，90%;胎牛血清，10%。
2.培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培【péi】养【yǎng】箱湿度为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
二.细胞处理：
复苏【sū】细胞：将【jiāng】含【hán】有lmL细胞悬液的冻【dòng】存管迅【xùn】速放入37°C水浴中（水面要低于冻存管盖【gài】部【bù】）摇晃解冻，移入事先准【zhǔn】备好【hǎo】的含有4mL培【péi】养基的15ml离心管中【zhōng】混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃【qì】去上【shàng】清液【yè】，加入【rù】lmL培
养基【jī】后吹匀。然后将所【suǒ】有细胞悬液【yè】移入含【hán】有5ml培养基的【de】培养【yǎng】瓶中【zhōng】培养过夜。第二天【tiān】换液并检【jiǎn】查细胞密度。
 
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一【yī】：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心【xīn】5分钟，弃去上【shàng】清液，补加l-2mL培养【yǎng】液【yè】后吹句，将细【xì】胞悬【xuán】液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养【yǎng】基的新皿中或者瓶中【zhōng】。（该细胞建议使用【yòng】*种方法，将所【suǒ】有细胞收集起【qǐ】来）
方法二【èr】：可选择【zé】半【bàn】数换液方式，弃去半数培养【yǎng】基后，将剩余细胞【bāo】悬起，将细胞悬液【yè】按1: 2到1: 3的比例分【fèn】到【dào】新的含【hán】8ml培养基的新皿中或者瓶中【zhōng】。
 
细胞冻存【cún】：待【dài】细【xì】胞生长状态【tài】良好时，可进行细【xì】胞【bāo】冻存。悬浮细【xì】胞【bāo】冻存【cún】时【shí】，应将细【xì】胞收集，1000RPM，常【cháng】温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞【bāo】吸走)，加入部【bù】分新鲜【xiān】培养基，吹打均匀后，加入到冻【dòng】存管中，在冻存管
中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。
 
大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)注意事项：
收到【dào】细胞后，若【ruò】发现【xiàn】干冰己挥发干净、冻【dòng】存管瓶盖脱【tuō】落、破损及细【xì】胞有污染，请立即与我们电【diàn】联。
所有动物细胞均视【shì】为【wéi】有潜在的生【shēng】物危【wēi】害性，必须在二级生物安全台内【nèi】操作，并【bìng】请注意防护【hù】，所【suǒ】有废液及【jí】接触过此细【xì】胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。