小鼠白血病细胞（P388）

小鼠白血病细胞(P388)
细胞特性
1)来源：小鼠
2)形态：圆形，悬浮生长
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保存：使用含有胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细【xì】胞后【hòu】，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台【tái】弃去上清，加入推荐 使用的培养【yǎng】基后转移【yí】至【zhì】l〇cm培【péi】养皿【mǐn】或者T25培养【yǎng】瓶【píng】中培养，传【chuán】代【dài】达到细胞生【shēng】长状态良好时【shí】，再进行冻存。具【jù】体【tǐ】操【cāo】作见细胞【bāo】培养步骤【zhòu】。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠白血病细胞(P388)细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640培养【yǎng】基(RPIVM-1640:GIBCO,添【tiān】加【jiā】 NaHC031.5g八, D-葡萄【táo】糖【táng】2.5g八，丙【bǐng】酮酸钠O.llg八)，90%;马血清，10%。
2.培养【yǎng】条件：气相：空气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温【wēn】度：37摄氏度，培养箱 湿度为【wéi】70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基【jī】，10%DMSO,现【xiàn】用现配。液氮储存【cún】。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻【dòng】存管【guǎn】在37°C水浴中迅速【sù】摇晃解【jiě】冻，加入【rù】4mL培养基混合均【jun1】匀。在1000RPM条件下【xià】离心4分钟，弃【qì】去上清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后【hòu】将所有【yǒu】细胞【bāo】悬液【yè】加入培养瓶【píng】中【zhōng】培养过夜（或【huò】将细胞悬液加入l〇cm皿【mǐn】中，加入约【yuē】8ml培【péi】养基，培养过夜）。第二天换液并检 查细胞密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细【xì】胞，1000RPM，常温条【tiáo】件下离心【xīn】5分钟【zhōng】，弃【qì】去上清【qīng】液，补加 l-2mL培【péi】养液后【hòu】吹【chuī】句，将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新【xīn】的含8ml培 养基的新皿中【zhōng】或【huò】者瓶中。
方法二：可【kě】选择【zé】半数换液方式，弃去半数培养【yǎng】基后【hòu】，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1: 2到1: 3的比【bǐ】例分到新的【de】含8ml培养基的新【xīn】皿中或者【zhě】瓶中。
细胞冻存【cún】：待【dài】细【xì】胞生长状态良好时，可进行【háng】细胞冻【dòng】存。悬浮细胞冻存时【shí】，应将细胞收【shōu】集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存【cún】上【shàng】清【qīng】液（防【fáng】止细胞吸【xī】走)，加【jiā】入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入【rù】到【dào】冻存管中，在【zài】冻存管中【zhōng】加入10%DMSO摇匀【yún】后进行冻存。
 
小鼠白血病细胞(P388)注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己【jǐ】挥发干净、冻【dòng】存管【guǎn】瓶盖脱落、破【pò】损及细【xì】胞【bāo】有【yǒu】污染，请立即与我们电联。
所有【yǒu】动【dòng】物细胞均视为【wéi】有潜在的生物危【wēi】害性，必须在二级生物【wù】安全台内操作，并【bìng】请【qǐng】注意防护，所有【yǒu】废液及接【jiē】触过此细胞的器皿需要灭菌【jun1】后方能丢【diū】弃。