小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞（Beta-TC-6）

小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞（Beta-TC-6）
细胞介绍
这株细胞来源于转基因小【xiǎo】鼠【shǔ】中生长的【de】一【yī】个胰腺【xiàn】肿瘤(胰【yí】岛素瘤)。这种小鼠携带了大鼠【shǔ】胰【yí】岛素II基因启动子【zǐ】调控的SV40早期基因的假基【jī】因结构。细【xì】胞包【bāo】含丰富的胰岛素和【hé】小量的【de】胰高【gāo】血糖素及【jí】生长抑素。响应葡萄糖而分泌胰岛素[PubMed:7533732]
 
细胞特性
1)来源：胰岛素瘤
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微镜【jìng】下【xià】确认细胞生长状态，去掉【diào】封【fēng】口膜并将【jiāng】T25瓶【píng】置于37°C培养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细【xì】胞长【zhǎng】满（90%以上【shàng】）请及【jí】时进行细胞传代，传代培【péi】养用6ml本公司【sī】附带的*培养基。
5.接到细胞次日，请检【jiǎn】查细胞是否污【wū】染【rǎn】，若发现污染或疑【yí】似污染，请及时【shí】与我们【men】取得【dé】电联。
 
小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞（Beta-TC-6）细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 DMEM/F12 培养基(DMEM/F12，GIBCO)，90%;胎牛血清【qīng】，10%。
2. 培养条件：气【qì】相：空气，95%;二【èr】氧化碳，5%。温度：37°C，培养箱湿【shī】度为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含【hán】有lmL细胞悬液的冻存【cún】管【guǎn】迅速放入37°C水浴【yù】中（水面要低于【yú】冻存【cún】管盖部）摇【yáo】晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基【jī】的【de】15ml离心【xīn】管【guǎn】中混合均匀。在1000RPM条件下离心【xīn】4分钟【zhōng】，弃去上清液，加入【rù】lmL培
养【yǎng】基后吹匀【yún】。然后将所有细胞悬液【yè】移入含有5ml培养【yǎng】基【jī】的培养【yǎng】瓶中培养过夜。
 
第二天换液并检查细胞密度。
细【xì】胞传代：如【rú】果【guǒ】细胞密度达80%-90%，即【jí】可进行传代培【péi】养。对于【yú】贴壁细胞，传代可参考以下方法：弃【qì】去培养上清【qīng】，用不含钙、镁离子【zǐ】的PBS润洗细【xì】胞9-21次。力口【kǒu】 2m丨【shù】消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养箱中消【xiāo】化9-21分钟，然后在显【xiǎn】微镜下观【guān】察【chá】细胞【bāo】消化情况，若细【xì】胞大部分【fèn】变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培【péi】养【yǎng】瓶后加入3ml此细胞的培【péi】养基终止消【xiāo】化。轻【qīng】轻吹打后吸出，移【yí】入【rù】15ml离心管中，在1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃【qì】去上清液【yè】，加入lmL培养液后吹匀。移入到事先准备【bèi】好的含有【yǒu】5ml培养【yǎng】基的【de】T-25培【péi】养瓶中或含有14ml培养的【de】T-75培养瓶中培【péi】养。
 
细胞冻存：
待【dài】细【xì】胞生【shēng】长状态良好时，可【kě】进【jìn】行细胞冻存。贴壁细胞冻存【cún】时，先要【yào】消化处理并进行细胞计数。消化方法按照【zhào】细胞传代方法【fǎ】的9-21步骤进行，后的重悬【xuán】液使用血清。悬【xuán】浮细胞【bāo】直接计数【shù】后【hòu】离心，用血清重悬浮，加【jiā】DMSO至终【zhōng】浓度为10%。加入【rù】DMSO后迅【xùn】速混匀，按每lml的【de】数【shù】量分配到冻存管中。本公司按【àn】每个冻存管细胞【bāo】数目大于【yú】1X106个细胞【bāo】冻存。 
 
小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞（Beta-TC-6）注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己挥【huī】发干净、冻存管瓶盖【gài】脱落【luò】、破损及细胞【bāo】有【yǒu】污染，请立即与我【wǒ】们电联【lián】。
所【suǒ】有动物细胞均【jun1】视为有潜在的生物危害性，必【bì】须在二级【jí】生物【wù】安全台内【nèi】操作【zuò】，并【bìng】请注意【yì】防护，所有废【fèi】液及接触过此细【xì】胞的【de】器皿需要灭菌后方能丢弃。