小鼠肾小球系膜细胞（SV40-MES-13）

小鼠肾小球系膜细胞(SV40-MES-13)
细胞介绍
该细胞系来源于转染SV40的转基因小鼠的肾脏。
 
细胞特性
1)来源：肾小球，小鼠
2)形态：成纤维细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请【qǐng】先在显微镜下确认细胞生长【zhǎng】状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37°C培【péi】养约【yuē】2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果【guǒ】细【xì】胞长满（90%以上【shàng】）请及时进行细胞传代【dài】，传【chuán】代培养【yǎng】用6ml本公【gōng】司附带的*培养基。
5.接到【dào】细胞次【cì】日，请检查细胞是否污染，若发【fā】现污染【rǎn】或疑似【sì】污染【rǎn】，请及时【shí】与我们取得电联。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠肾小球系膜细胞(SV40-MES-13)本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备培养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium(CatalogNo_30-2002): Ham'sF12mediumwith14mMHEPES=3:l，即【jí】三【sān】份的DMEM，1份【fèn】 Ham'sF12
混合培养基)，85%;胎牛血清，5%。
2.培【péi】养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温【wēn】度：37°C，培【péi】养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管【guǎn】迅【xùn】速放入【rù】37°C水浴中（水面要低 于冻存管盖【gài】部）摇晃【huǎng】解冻，移入事先准备好的【de】含有4mL培养基的15ml离心 管中【zhōng】混合均匀【yún】。在【zài】1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃去上清液【yè】，加入lmL培 养基后吹匀。然后将所【suǒ】有细胞悬【xuán】液移入【rù】含【hán】有5ml培养基的【de】培养瓶【píng】中培养过夜。 第二【èr】天换【huàn】液并检查细胞密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。
力口2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置【zhì】于37°C培
养【yǎng】箱中【zhōng】消化9-21分钟，然【rán】后【hòu】在显【xiǎn】微【wēi】镜下观【guān】察细胞消化【huà】情【qíng】况，若细胞大部分【fèn】变圆并脱【tuō】落，迅速拿回操作台，轻敲几【jǐ】下培养瓶后加入3ml此细【xì】胞的培养基终止消化。
轻轻【qīng】吹打后【hòu】吸出，移入【rù】15ml离心【xīn】管中，在1000RPM条件下离心4分钟【zhōng】，弃【qì】去上清液，加入lmL培养液后吹匀。
移【yí】入到事先准备好的含【hán】有5ml培养基的【de】T-25培养瓶中【zhōng】或含有14ml培养基【jī】的T-75培养瓶中培【péi】养【yǎng】。
 
细【xì】胞冻存：待细胞生长【zhǎng】状态良【liáng】好【hǎo】时，可进行细胞【bāo】冻【dòng】存【cún】。贴壁【bì】细胞【bāo】冻存时，先【xiān】要消化处理并进行细胞计【jì】数。消化方法按照细胞传代方法【fǎ】的9-21步骤【zhòu】进行， 后的重悬【xuán】液使用血清。悬【xuán】浮【fú】细胞直接计数后离【lí】心【xīn】，用血清重【chóng】悬浮，加DMSO至【zhì】终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每【měi】lml的数量【liàng】分配到冻存管 中。本【běn】公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞【bāo】冻存。
 
小鼠肾小球系膜细胞(SV40-MES-13)注意事项：
收到细胞后，若发【fā】现干冰己【jǐ】挥发干净、冻存管瓶盖【gài】脱落【luò】、破损及细胞有污染【rǎn】，请立【lì】即与我们电联【lián】。
所有动物细【xì】胞均【jun1】视为有潜【qián】在的【de】生物【wù】危害性，必【bì】须在二级【jí】生物安全台内操作，并请注意防护，所【suǒ】有废液及接【jiē】触【chù】过此细胞【bāo】的器皿需要灭菌后方能丢弃。