小鼠肺上皮细胞（TC-1）

小鼠肺上皮细胞(TC-1)
细胞介绍
该细胞【bāo】为【wéi】HPV16E6、E7和ras基因共转化【huà】的C57BL/C(H-2b)小【xiǎo】鼠肺上【shàng】皮细胞。
 
细胞特性
1)来源：小鼠肺
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显【xiǎn】微镜下【xià】确认细胞生长状态，去掉封口膜并将【jiāng】T25瓶【píng】置于【yú】37°C培养约【yuē】 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细胞长满（90%以【yǐ】上）请及时【shí】进行细胞传【chuán】代【dài】，传代培养用6ml本公司附 带的*培养基。
5.接【jiē】到细胞次日，请检查【chá】细胞是否污染，若【ruò】发现污染或疑似污染，请及时与我 们【men】取得电联【lián】。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠肺上皮细胞(TC-1)本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备DMEM培【péi】养基(DMEM，GIBCO)，90%;胎牛血清，10%。
2. 培【péi】养【yǎng】条件【jiàn】：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培养【yǎng】箱【xiāng】湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞【bāo】：将含【hán】有lmL细【xì】胞悬液的【de】冻存管迅速【sù】放入37°C水浴中（水面要低于冻存管【guǎn】盖部）摇晃解冻，移【yí】入【rù】事先准备好的含【hán】有4mL培养基的15ml离心管【guǎn】中混合【hé】均匀。在1000RPM条件【jiàn】下【xià】离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培养基后吹【chuī】匀【yún】。然后将所有细胞悬液【yè】移【yí】入含有5ml培养基的培养瓶【píng】中培养过夜。 第二天【tiān】换液并检查细【xì】胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。
力口2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中，置于37°C培
养箱中【zhōng】消化9-21分钟，然【rán】后在显微镜下观察【chá】细胞消化情况【kuàng】，若细胞大部分变圆并脱落【luò】，迅速拿【ná】回操作【zuò】台，轻敲几【jǐ】下培养瓶后【hòu】加入3ml此细胞【bāo】的培养基【jī】终止消化。
轻【qīng】轻吹打后吸出【chū】，移入15ml离【lí】心【xīn】管中，在1000RPM条件下离心【xīn】4分钟，弃去上清液，加入lmL培【péi】养液后吹匀。
移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培【péi】养瓶【píng】中或含【hán】有14ml培养基的【de】T-75培养【yǎng】瓶【píng】中培养。
 
细【xì】胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存【cún】。贴【tiē】壁细【xì】胞冻存时，先要消化【huà】处理并进行细【xì】胞计数。消化方【fāng】法按照细胞传代方法的9-21步骤【zhòu】进行， 后的重悬液使用血【xuè】清。悬浮【fú】细胞直【zhí】接【jiē】计数后离心，用血【xuè】清重【chóng】悬浮【fú】，加【jiā】DMSO至终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每lml的数量分【fèn】配到冻存管 中。本公【gōng】司按【àn】每个冻存【cún】管细胞数目大于1X106个细【xì】胞冻存【cún】。
 
小鼠肺上皮细胞(TC-1)注意事项：
收到细胞后，若发现【xiàn】干【gàn】冰己【jǐ】挥发干净【jìng】、冻存管瓶盖【gài】脱落、破损及细胞有污染，请【qǐng】立即与我们电联。
所有动【dòng】物【wù】细胞均视为有【yǒu】潜在【zài】的【de】生物【wù】危害性，必须在【zài】二级生【shēng】物安全台内操作，并【bìng】请注意【yì】防护，所有废液及接触过此【cǐ】细胞的【de】器皿需要灭菌后方能丢弃。