小鼠肾癌细胞（Renca）

小鼠肾癌细胞(Renca)
细胞介绍
该细胞的生长繁殖模式精确模拟了人肾【shèn】癌细胞，特别是在同【tóng】时【shí】迁【qiān】移至【zhì】肺部和肝部等【děng】方面。该细胞不【bú】表【biǎo】达(3-转【zhuǎn】化生长【zhǎng】因子II受体。
 
细胞特性
1)来源：小鼠肾
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保存：使【shǐ】用含有胎【tāi】牛血清的2ml冻【dòng】存管发送存活细胞。收【shōu】到细胞后， 可在1000RPM，常温条【tiáo】件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清【qīng】，加入推荐使用的培养基后转移【yí】至l〇cm培养皿【mǐn】或者T25培【péi】养【yǎng】瓶中【zhōng】培养，传代达到细【xì】胞生【shēng】长【zhǎng】状态良好时，再进行冻存【cún】。具体操作见【jiàn】细【xì】胞培【péi】养【yǎng】步骤。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠肾癌细胞(Renca)细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培【péi】养【yǎng】基【jī】(RPMI-1640:GIBCO)，90%;胎牛
血清，10%。
2. 培养【yǎng】条件：气【qì】相：空气，95%;二氧化【huà】碳，5%。温度：37摄氏度，培【péi】养箱【xiāng】湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现【xiàn】用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞【bāo】：将含有lmL细【xì】胞悬液【yè】的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培【péi】养基混合均匀。在1000RPM条件下离【lí】心【xīn】4分钟，弃去上【shàng】清液，补加l-2mL培养【yǎng】基后吹匀【yún】。然【rán】后将所有细胞悬【xuán】液加入培养瓶中培【péi】养过夜【yè】（或将细胞悬液加入l〇cm皿中【zhōng】，加入约8ml培养基【jī】，培养过夜）。第二天【tiān】换液并【bìng】检 查细胞密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。
力口2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培【péi】养瓶中，置于37°C培【péi】
养箱【xiāng】中【zhōng】消化9-21分【fèn】钟，然【rán】后【hòu】在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞【bāo】大【dà】部分变圆并脱落，迅【xùn】速拿回操作台【tái】，轻敲几【jǐ】下培养瓶后加少【shǎo】量培养基终止消化。
按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃去【qù】上清液，补【bǔ】加l-2mL培【péi】养【yǎng】液【yè】后吹【chuī】匀。
将细胞【bāo】悬液按1: 2到1: 5的比例分到新【xīn】的【de】含8ml培养基的新皿中【zhōng】或者瓶中。
 
细【xì】胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻【dòng】存【cún】。贴壁【bì】细胞冻存时，弃【qì】去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆【yuán】脱【tuō】落后，加入约lml含血清的培养【yǎng】基后加入冻存【cún】管【guǎn】中【zhōng】，再添加1〇%DMSO后【hòu】进行冻存【cún】。
 
小鼠肾癌细胞(Renca)注意事项：
收到细胞后，若发现干【gàn】冰己挥发【fā】干【gàn】净、冻存管瓶盖【gài】脱落、破损及细胞有【yǒu】污染，请【qǐng】立即与我【wǒ】们电联。
所有动物细胞均视【shì】为有潜在【zài】的生【shēng】物危【wēi】害性，必须在二级生物安全台内操作【zuò】，并【bìng】请【qǐng】注意防护，所有废液及接触【chù】过此细胞【bāo】的器皿需要【yào】灭菌后【hòu】方能丢弃。