人结肠腺癌细胞（COLO-320）

人结肠腺癌细胞(COLO-320)
细胞介绍：
该细胞能合成复合胺，肾上腺素。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八, D-葡萄【táo】糖2.5g八，丙酮酸钠O.llg八)，90%;胎牛血清【qīng】，10%。或DMEM 培养基(GIBCO,添加 NaHC031.5g八)，90%;胎牛【niú】血清，10%。
2. 培【péi】养条件：气相：空气，95%;二【èr】氧化【huà】碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存【cún】液：90%*培养基【jī】，10%DMSO,现用【yòng】现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将【jiāng】含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水【shuǐ】浴中迅速摇【yáo】晃解冻，加入4mL培养【yǎng】基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清【qīng】液，补加l-2mL培养基后吹匀。然【rán】后将所有【yǒu】细【xì】胞【bāo】悬液加【jiā】入培养【yǎng】瓶中【zhōng】培养【yǎng】过夜【yè】（或将细胞悬液加【jiā】入l〇cm皿【mǐn】中，加入【rù】约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液【yè】并检 查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人结肠腺癌细胞(COLO-320)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清【qīng】，用不含钙【gài】、镁离子的PBS润【rùn】洗细胞9-21次【cì】。力【lì】口【kǒu】2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中【zhōng】，置【zhì】于37°C培养箱中【zhōng】消化9-21分钟【zhōng】，然【rán】后在显【xiǎn】微镜下观察细胞消化情况【kuàng】，若细胞大部分变圆并脱【tuō】落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加【jiā】少量培养基终止消化。按6-8ml/瓶【píng】补加培养【yǎng】基，轻轻打匀【yún】后吸出【chū】，在1000RPM条件下离心4分 钟【zhōng】，弃去上清液【yè】，补加l-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分【fèn】到新的含8ml培养基【jī】的新皿中或者【zhě】 瓶中【zhōng】。
 
细胞冻【dòng】存：待细胞生【shēng】长状【zhuàng】态良好时，可进行细【xì】胞冻存。贴壁细胞冻存【cún】时【shí】，弃 去【qù】培【péi】养基后加入少量胰酶，细【xì】胞变【biàn】圆脱落后，加入约lml含血清的培养基后加入冻存管【guǎn】中，再添加1〇%DMSO后【hòu】进行冻存【cún】。
 
注意事项：
收【shōu】到细胞后，若发现干冰己挥发【fā】干净、冻存管瓶【píng】盖脱落、破损及细胞有【yǒu】污染，请立 即与我们电联【lián】。
所【suǒ】有动物细胞均【jun1】视【shì】为【wéi】有潜在【zài】的生【shēng】物危害性，必须在二【èr】级生物安全台内操作，并【bìng】请注 意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后【hòu】方能【néng】丢弃【qì】。
 
人结肠腺癌细胞(COLO-320)细胞特性：
1)来源：人结肠癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保存：使用含有【yǒu】胎【tāi】牛血清的2ml冻存【cún】管发送存【cún】活细【xì】胞【bāo】。收到细胞后， 可在1000RPM，常温条【tiáo】件下，离【lí】心【xīn】5min后，于洁净操作台弃去上【shàng】清，加入推【tuī】荐使【shǐ】用的培养基后转移【yí】至l〇cm培养皿【mǐn】或者T75培【péi】养瓶中培养，传代达【dá】到细胞生【shēng】长 状态良好时，再进行冻存。具【jù】体操作见细胞培养步骤。