T细胞淋巴瘤细胞 （Karpas299）

T细胞淋巴瘤细胞 (Karpas299)
细胞介绍：
该细胞系为间变性淋巴瘤激酶(ALK)阳性。
 
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
准备【bèi】 RPIVM-1640 培养【yǎng】基(RPMI-1640:GIBCO)，90%;胎牛血清，10%。
培养【yǎng】条件：气相【xiàng】：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培养箱湿【shī】度为70%-80%。
冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞【bāo】：将含有lmL细胞悬液的冻存管迅速【sù】放入37°C水浴中【zhōng】（水【shuǐ】面要【yào】低于冻存管盖部）摇晃解【jiě】冻，移入事先【xiān】准备好的【de】含【hán】有【yǒu】4mL培【péi】养【yǎng】基的15ml离心管中混合均匀【yún】。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清【qīng】液，加入lmL培 养基后【hòu】吹匀。然【rán】后将所【suǒ】有细胞悬液移入含有5ml培养基的培【péi】养瓶【píng】中培养【yǎng】过夜。第二天【tiān】换【huàn】液并检查【chá】细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
T细胞淋巴瘤细胞 (Karpas299)对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞【bāo】，1000RPM，常温条件下离心5分【fèn】钟，弃去上清【qīng】液，补加 l-2mL培【péi】养液后吹句，将细胞悬液【yè】按1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到新的含8ml培 养基的新皿中或者瓶中。

方法二【èr】：可选【xuǎn】择半数换液方式，弃【qì】去半数培【péi】养基后，将剩余细胞悬起，将细胞【bāo】悬液按【àn】1: 2到1: 3的【de】比【bǐ】例分【fèn】到新【xīn】的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞【bāo】冻存：待细胞生长状【zhuàng】态【tài】良好【hǎo】时，可进行细胞冻存。悬浮细胞【bāo】冻存时，应【yīng】将细【xì】胞收集【jí】，1000RPM，常温条件【jiàn】下离心5分【fèn】钟，少量保存上清液（防止细胞吸【xī】走)，加【jiā】入【rù】部分新【xīn】鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管 中加入10%DMSO摇【yáo】匀后进行【háng】冻【dòng】存。

 
注意事项：
收到细胞后，若【ruò】发现干冰己挥发干净【jìng】、冻存管瓶【píng】盖脱【tuō】落、破损及细胞有污染，请【qǐng】立即与我们【men】电【diàn】联。
所有动物细【xì】胞均视为有潜【qián】在的【de】生物危害性，必须在二【èr】级【jí】生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接【jiē】触过【guò】此细【xì】胞的器皿【mǐn】需要灭菌后方能丢弃。

 
细胞特性：
1)来源：淋巴瘤
2)形态：圆形，悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
T细胞淋巴瘤细胞 (Karpas299)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先【xiān】在显微镜下确认细胞【bāo】生【shēng】长【zhǎng】状【zhuàng】态，去掉封口膜并将T25瓶【píng】置于37°C培养约 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细【xì】胞长满（90%以上）请【qǐng】及时进行细胞【bāo】传【chuán】代，传代培【péi】养用6ml本公司附【fù】带的*培【péi】养基。
5.接到细胞次日【rì】，请检【jiǎn】查细【xì】胞是否污染，若发现污【wū】染或疑似【sì】污染，请及时【shí】与我们取得电联。
细胞用途：仅供使用。