人慢性髓系白血病细胞 （K562）

人慢性髓系白血病细胞 (K562)
细胞介绍：
该细胞是由【yóu】Lozzio从一名53岁的慢【màn】性髓细【xì】胞性白血病急变期的【de】女性患者的胸水中【zhōng】分离【lí】建立的。该细胞曾【céng】被认为来【lái】源于粒【lì】系【xì】，处于高度未分化阶段【duàn】；Anderson 等【děng】人作了【le】细胞膜特性的研【yán】究【jiū】后，认【rèn】为该细胞是红白血病细【xì】胞系。该细胞是对【duì】自然 杀伤细【xì】胞高度敏感【gǎn】的体外靶标【biāo】，故【gù】而被广泛应【yīng】用于这方【fāng】面的研究。K562的原始【shǐ】 细胞【bāo】是一种具有多向【xiàng】分化潜能【néng】的造血系统的恶性肿瘤细【xì】胞，能自发分化为红系、粒【lì】系和【hé】单核【hé】系【xì】的【de】可辨识的祖细胞。该细胞表达CD7(25 % )。

 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 RPIVM-1640培养基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八, D-葡【pú】萄糖2.5g八，丙酮酸【suān】钠O.llg八)，90%;胎牛血清%。

2.培养条件【jiàn】：气相【xiàng】：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏【shì】度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液【yè】：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液氮【dàn】储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将【jiāng】含【hán】有【yǒu】lmL细胞悬液的【de】冻【dòng】存【cún】管在37°C水浴中迅速摇晃【huǎng】解冻【dòng】，加【jiā】入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃去上清液，补加l-2mL培养【yǎng】基【jī】后吹匀。然后将【jiāng】所有细胞悬液加入培养【yǎng】瓶【píng】中培【péi】养过夜（或将 细胞【bāo】悬液加【jiā】入l〇cm皿【mǐn】中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人慢性髓系白血病细胞 (K562)对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法【fǎ】一【yī】：收【shōu】集【jí】细【xì】胞，1000RPM条【tiáo】件下离心4分钟，弃去上清液，补加【jiā】l-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的比例分【fèn】到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法【fǎ】二：可选择半数换【huàn】液方式，弃去【qù】半数培养基【jī】后【hòu】，将剩【shèng】余细胞悬起，将细胞悬液按1: 2到1: 3的比例分【fèn】到新的含8ml培养【yǎng】基的新皿中或者瓶中。

 
细胞冻存【cún】：待细胞生【shēng】长状态良好时，可进行【háng】细【xì】胞冻存。悬浮细胞冻【dòng】存时，应将细【xì】胞收【shōu】集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保【bǎo】上【shàng】清液（防止细胞【bāo】吸走)，加入部分新鲜培养基，加入【rù】到冻【dòng】存管中，在冻【dòng】存管中加入10%DMSO后进【jìn】行冻存。

注意事项：
收【shōu】到细【xì】胞后，若发现干冰己挥发干净、冻【dòng】存管瓶盖脱落、破损【sǔn】及【jí】细胞有污染，请立即【jí】与我【wǒ】们电联【lián】。
所【suǒ】有动物细胞均视【shì】为有潜在的生物危害性，必须【xū】在二级生物安全【quán】台内操作【zuò】，并请注【zhù】意【yì】防护，所有废液及接触过此细胞【bāo】的器皿【mǐn】需要灭菌后方能丢弃。

 
细胞特性：
1)来源：骨髓
2)形态：淋巴母细胞样；圆形，悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人慢性髓系白血病细胞 (K562)运【yùn】输和【hé】保存：使用【yòng】含【hán】有胎牛血清的2ml冻存管【guǎn】发送存活细胞。收到细胞【bāo】后，可在1000RPM，常温条件【jiàn】下，离心【xīn】5min后，于洁净操作台【tái】弃去上清，加【jiā】入推荐使用的【de】培【péi】养基后转移至l〇cm培养【yǎng】皿或者T25培养瓶中培养【yǎng】，传【chuán】代达【dá】到细胞生长状态良好时，再【zài】进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供使用。