人正常膀胱上皮细胞（SV-HUC-1）

人正常膀胱上皮细胞(SV-HUC-1)
细胞介绍：
这株细胞是【shì】正常输尿管组织用【yòng】SV40转染【rǎn】建株的【de】。反复用非【fēi】洲绿【lǜ】猴肾细胞平板【bǎn】测试检测传染性SV40的，结果【guǒ】都呈阴性。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 F-12K 培养【yǎng】基（GIBCO)，90%;胎牛血清【qīng】，10%。
2.培养【yǎng】条件：气相：空气，95%;二氧化【huà】碳，5%。温【wēn】度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配【pèi】。液【yè】氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将【jiāng】含有lmL细【xì】胞悬液的冻存管在37°C水浴【yù】中【zhōng】迅【xùn】速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均【jun1】匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液【yè】，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬【xuán】液加入【rù】培养瓶【píng】中培养过夜（或将细胞【bāo】悬液【yè】加入l〇cm皿中，加入约【yuē】8ml培养基，培养【yǎng】过夜【yè】）。第二【èr】天换液【yè】并检查细【xì】胞【bāo】密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人正常膀胱上皮细胞(SV-HUC-1)对于【yú】贴壁【bì】细胞，传代可参考以下方【fāng】法【fǎ】：弃【qì】去培养【yǎng】上清，用不含【hán】钙、镁【měi】离子的PBS润洗【xǐ】细胞9-21次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养箱中消化9-21分钟，然【rán】后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅【xùn】速拿回【huí】操作台，轻敲几下培养瓶后加【jiā】少量【liàng】培养基终止消化。按6-8ml/瓶【píng】补加【jiā】培养基，轻轻打匀后【hòu】吸出，在1000RPM条【tiáo】件下离心【xīn】4分 钟，弃【qì】去上【shàng】清液，补加【jiā】l-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液【yè】按1: 2到1: 5的【de】比例分【fèn】到新【xīn】的含8ml培养【yǎng】基的新【xīn】皿中【zhōng】或者瓶中。
 
细胞冻【dòng】存：待细【xì】胞生【shēng】长【zhǎng】状态良好时，可进行细胞冻存【cún】。贴壁细胞冻存时【shí】，弃去培养基后【hòu】加【jiā】入【rù】少量胰酶，细胞变【biàn】圆脱落后，加入约lml含血清的【de】培养基后【hòu】加入冻存管【guǎn】中，再添加1〇%DMSO后进【jìn】行冻存。
 
注意事项：
收到细胞后【hòu】，若发现干冰己挥发干净、冻【dòng】存【cún】管瓶【píng】盖【gài】脱落、破损及细胞有污染，请立即与我【wǒ】们【men】电联。
所有动物细胞均视为【wéi】有潜在的【de】生物危害【hài】性，必须在二级【jí】生【shēng】物安全台内操作【zuò】，并请注【zhù】意防护，所有废【fèi】液及接触过【guò】此细胞的器皿【mǐn】需要灭菌后【hòu】方能丢弃瓶中。
 
细胞特性：
1)来源：膀胱
2)形态：上皮细胞
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人正常膀胱上皮细胞(SV-HUC-1)运输和保存：使用含有胎牛血清的2ml冻【dòng】存管发【fā】送存活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于【yú】洁净操作【zuò】台弃【qì】去上【shàng】清，加入推荐使用【yòng】的培【péi】养【yǎng】基后转移至l〇cm培【péi】养皿或者T25培养瓶中【zhōng】培【péi】养，传代【dài】达到细胞【bāo】生长状态良【liáng】好时，再进行冻存。具体操作见【jiàn】细胞培养步骤【zhòu】。
细胞用途：仅供使用。