人结直肠腺癌细胞（SW-480）

人结直肠腺癌细胞(SW-480)
细胞介绍：
该细胞来源于一个50岁的男性结肠癌患者。
 
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备L-15培养基(GIBCO)，90%;北美胎牛血清，10%。
2.培养条件：气相：空气，100%。温【wēn】度【dù】：37°C，培【péi】养箱【xiāng】湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
 复苏【sū】细胞【bāo】：将含有lmL细胞悬液【yè】的冻存管迅速放入37°C水【shuǐ】浴中（水面要低于冻存【cún】管【guǎn】盖部）摇晃【huǎng】解冻，移入【rù】事【shì】先准备好的含有【yǒu】4mL培【péi】养基的15ml离心管中混合均【jun1】匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去【qù】上清液【yè】，加入【rù】lmL培【péi】 养基后吹匀。然后将所有【yǒu】细胞悬液【yè】移入含有5ml培养基的【de】培养瓶中培养过夜。 第二【èr】天换液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人结直肠腺癌细胞(SW-480)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上【shàng】清【qīng】，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞【bāo】9-21次【cì】。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中，置于37°C培养箱中消化9-21分钟，然后在显微【wēi】镜下观察细胞消化【huà】情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅【xùn】速拿【ná】回操作【zuò】台，轻敲【qiāo】几下培养瓶后加入2ml细胞【bāo】*培【péi】养基终止消化。轻轻吹打后吸出【chū】，移入15ml离心管中，在【zài】1000RPM条【tiáo】件下离心【xīn】4分【fèn】钟，弃去上【shàng】清【qīng】液，加入lmL培养液后吹匀。移入到事先准备【bèi】好的【de】含【hán】有5ml培养【yǎng】基的【de】T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中【zhōng】培【péi】养。
 
细胞冻存：待【dài】细胞生长状态【tài】良好时，可进行细胞【bāo】冻存。贴壁细【xì】胞冻存时，先要消【xiāo】化处理并进行细胞计数。消【xiāo】化方法按照细胞传代方法的9-21步骤进行，后的【de】重悬【xuán】液使用【yòng】血【xuè】清。加DMSO至终浓度【dù】为10%。加入DMSO后【hòu】迅速混 匀【yún】，按【àn】每lml的数量分配到冻【dòng】存【cún】管中。本公司【sī】按【àn】每个冻存管细【xì】胞数目大于1X106个【gè】细胞冻存【cún】。
 
注意事项：
收到细胞后，若发现【xiàn】干冰【bīng】己挥发干【gàn】净、冻存管瓶盖脱落【luò】、破【pò】损及细【xì】胞有【yǒu】污染，请立即与我们电联。
所有动物细胞均视为有潜【qián】在的生物【wù】危害性【xìng】，必须在【zài】二级【jí】生物安全台【tái】内【nèi】操作，并请注意【yì】防【fáng】护，所有废【fèi】液及接触过此细【xì】胞的器皿【mǐn】需要灭菌后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：结直肠癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人结直肠腺癌细胞(SW-480)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微镜下确认【rèn】细胞生【shēng】长【zhǎng】状态【tài】，去掉封口膜并【bìng】将T25瓶置于37°C培养约 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如【rú】果细胞长【zhǎng】满（80%-90%)请及【jí】时进【jìn】行细胞传代，传代培养用【yòng】6ml本公司附带【dài】的*培养基。
5.接到细胞次【cì】日，请检查细【xì】胞是否污染【rǎn】，若【ruò】发现污染或疑似污染，请及【jí】时与我们【men】取【qǔ】得电联。
细胞用途：仅供使用。