人甲状腺鳞癌细胞（SW579）

人甲状腺鳞癌细胞(SW579)
细胞介绍：
在裸鼠中成瘤(产生三级恶性纺锤状巨细胞瘤)。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.L-15培养【yǎng】基(GIBCO)，90%;胎牛血清，10%。培【péi】养条件: 气相：空【kōng】气，100%。温度【dù】：37摄氏度。
2.冻存液：90%*培【péi】养【yǎng】基，10%DMSO,现用【yòng】现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞：将含有【yǒu】lmL细胞悬【xuán】液的冻存管在37°C水浴中迅【xùn】速摇【yáo】晃解冻【dòng】，加入4mL培【péi】养基混合均匀【yún】。在1000RPM条件下离心4分钟，弃【qì】去上清液，补加l-2mL培养【yǎng】基后吹匀【yún】。然后将所有细胞悬液【yè】加【jiā】入培养瓶中培养过夜【yè】（或将【jiāng】细【xì】胞【bāo】悬液加入【rù】l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二【èr】天换液并检查细胞【bāo】密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人甲状腺鳞癌细胞(SW579)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用【yòng】不【bú】含钙【gài】、镁离子的PBS润洗细【xì】胞【bāo】9-21次。力【lì】口2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于【yú】37°C培养箱【xiāng】中消化9-21分钟【zhōng】，然后【hòu】在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅【xùn】速拿回【huí】操【cāo】作台，轻【qīng】敲几下培养瓶后加少【shǎo】量培养基终【zhōng】止【zhǐ】消化。按6-8ml/瓶补加【jiā】培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件【jiàn】下离心4分【fèn】钟，弃去上清【qīng】液，补加l-2mL培【péi】养液后吹【chuī】匀。将细【xì】胞悬液按1: 2到1: 5的比例分【fèn】到新的含8ml培【péi】养【yǎng】基的新皿中或者瓶中。
 
细胞【bāo】冻存：待细胞【bāo】生长状态良【liáng】好时，可进行细胞【bāo】冻存。贴【tiē】壁细胞冻存时，弃去【qù】培养【yǎng】基后加入少量胰酶，细胞变圆【yuán】脱落后，加入约lml含血清【qīng】的培养【yǎng】基【jī】后加入【rù】冻存管中，再添加1〇%DMSO后进行冻存。
 
注意事项：
收到细【xì】胞后，若发现干冰己挥发干净、冻【dòng】存管瓶盖脱落、破损及细胞【bāo】有污染，请【qǐng】立即与我们电联【lián】。
所有动物细胞均视为有潜【qián】在的生物危害性，必须【xū】在二级【jí】生【shēng】物安全台【tái】内操作，并请注意防护【hù】，所有废液及接触【chù】过此细【xì】胞【bāo】的器【qì】皿【mǐn】需要灭菌【jun1】后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：甲状腺
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人甲状腺鳞癌细胞(SW579)运【yùn】输和【hé】保存：使用【yòng】含有胎牛血【xuè】清【qīng】的2ml冻存【cún】管【guǎn】发送存【cún】活细胞。收到细胞后，可在【zài】1000RPM，常温条件下，离心5min后【hòu】，于【yú】洁净操作台弃去上清，加入推荐使【shǐ】用的培养基后转移至l〇cm培【péi】养皿或者T75培养瓶中培养，传【chuán】代达到【dào】细胞生长状态良【liáng】好时，再进行【háng】冻存【cún】。具【jù】体操作见细【xì】胞培养【yǎng】步骤。
细胞用途：仅供使用。