人肾癌细胞 （A498）

人肾癌细胞 (A498)
细胞介绍：
该细胞系【xì】由Aaronson S建立，源自一位52岁患有肾癌【ái】的女性【xìng】病人【rén】。
  
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1. 准【zhǔn】备MEM培养基(MEM:GIBCO  90%;胎【tāi】牛血清，10%。
2.培养条件：气相：空气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温度【dù】：37摄氏【shì】度，培养箱湿度为70%-80%。
3. 冻存液：90%*培养【yǎng】基【jī】，10%DMSO,现【xiàn】用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞【bāo】：将【jiāng】含有lmL细胞【bāo】悬【xuán】液的冻存【cún】管在【zài】37°C水浴中【zhōng】迅【xùn】速【sù】摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条【tiáo】件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培【péi】养【yǎng】基后吹匀。然后将所有【yǒu】细胞悬液【yè】加入【rù】培【péi】养瓶中【zhōng】培【péi】养过夜（或将细胞【bāo】悬【xuán】液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养基【jī】，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人肾癌细胞 (A498)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含【hán】钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中，置于37°C培【péi】养【yǎng】箱中消【xiāo】化9-21分【fèn】钟，然后在显【xiǎn】微【wēi】镜【jìng】下观察细胞【bāo】消化情【qíng】况【kuàng】，若细胞大部【bù】 分变圆并脱落，迅速拿回操【cāo】作台，轻敲几下【xià】培养瓶后加少量培养【yǎng】基终止消化【huà】。按6-8ml/瓶【píng】补加培【péi】养基，轻轻打匀【yún】后吸【xī】出，在1000RPM条件【jiàn】下离心4分 钟，弃去上【shàng】清液【yè】，补加l-2mL培养【yǎng】液后吹匀。将细胞【bāo】悬液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到【dào】新的含8ml培养【yǎng】基的【de】新【xīn】皿中。
 
细胞冻存：待【dài】细胞生【shēng】长状【zhuàng】态良好时，可进行细胞【bāo】冻存。贴壁细胞冻【dòng】存【cún】时，弃去培【péi】养基后加【jiā】入少量胰【yí】酶，细【xì】胞变圆脱落后，加【jiā】入约lml含血清的培养基后 加入冻存管中，再添【tiān】加1〇%DMSO后进行【háng】冻【dòng】存。
 
注意事项：
收到【dào】细【xì】胞后，若【ruò】发【fā】现干冰己挥发干【gàn】净、冻存管瓶盖脱落、破损及细【xì】胞有污【wū】染，请立 即与我们电联。
所有动【dòng】物细胞均【jun1】视【shì】为有潜在的生物危【wēi】害【hài】性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接【jiē】触过此细胞【bāo】的器皿需【xū】要灭菌【jun1】后【hòu】方【fāng】能丢弃瓶中【zhōng】。
 
细胞特性：
1)来源：肾癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人肾癌细胞 (A498)运输和【hé】保存【cún】：可选择干冰运输【shū】及发送复【fù】苏存【cún】活细胞【bāo】方【fāng】式：（1)干冰运输，收到后立【lì】即转入液氮冻存或【huò】直接复苏；（2)存活细胞，收到后应继续生【shēng】长，传代达到细 胞生长【zhǎng】状【zhuàng】态良好时，再进行冻存。具【jù】体操作见细胞培养步【bù】骤。
细胞用途：仅供使用。