人涎腺癌细胞（ACC-M）

人涎腺癌细胞(ACC-M)
细胞介绍：
ACC-M细胞【bāo】是【shì】ACC-2细胞系【xì】经体内外不断选择【zé】获得的肺【fèi】转移细胞株（ACC-2不形成肺【fèi】转移），其裸鼠体【tǐ】内肺转移率达【dá】96%。该细【xì】胞株【zhū】除保留了上皮和腺源性的特【tè】性外，体外生【shēng】长能力大大增强。己【jǐ】证【zhèng】明该【gāi】细【xì】胞株是建立肺高转移性裸鼠模型的【de】极【jí】 佳材料。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培【péi】养基(RPIVM-1640:GIBCO，添【tiān】加 NaHC031.5g八, D-葡萄糖2.5g八，丙酮酸钠O.llg八)，90%;胎牛血清，10%。
2. 培养条件：气【qì】相：空气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄【shè】氏度，培养箱 湿度为【wéi】70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用【yòng】现配。液【yè】氮储存。
2)细胞处理：
复【fù】苏【sū】细胞【bāo】：将含有lmL细胞【bāo】悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻【dòng】，加入4mL培养基混合均匀【yún】。在1000RPM条【tiáo】件下离心4分钟，弃去上清液，补加【jiā】l-2mL培养基后吹匀。然后【hòu】将所有细胞悬【xuán】液加【jiā】入培养【yǎng】瓶中培【péi】养过夜（或将 细胞悬液加【jiā】入l〇cm皿中，加入约8ml培养基【jī】，培养过夜）。第二天【tiān】换【huàn】液并检 查细胞【bāo】密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人涎腺癌细胞(ACC-M)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清【qīng】，用不【bú】含钙、镁离【lí】子的【de】PBS润【rùn】洗细胞9-21次。力【lì】口 2m丨【shù】消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养箱中【zhōng】消化9-21分钟，然后在显微【wēi】镜【jìng】下【xià】观察【chá】细【xì】胞消化情况，若细胞大部分变【biàn】圆并脱【tuō】落，迅速拿回操作【zuò】台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止 消化。按6-8ml/瓶补加培【péi】养【yǎng】基，轻轻打匀后吸出【chū】，在1000RPM条件下离心4分钟，弃【qì】去上清【qīng】液，补加l-2mL培养液后吹匀【yún】。将细【xì】胞悬液按1: 2到1: 5的【de】比例分到新的含8ml培养基的新皿中【zhōng】或者瓶中。
 
细【xì】胞冻【dòng】存：待细胞生【shēng】长状态良好时，可进行细胞冻【dòng】存。贴壁细胞冻存时【shí】，弃去培养基【jī】后加入少量胰酶，细【xì】胞【bāo】变圆脱落【luò】后，加【jiā】入约lml含血清的培养基【jī】后加入冻存管中，再【zài】添加1〇%DMSO后进【jìn】行冻存。
 
注意事项：
收【shōu】到细胞后，若发【fā】现干冰己挥【huī】发干净、冻存管瓶盖【gài】脱落【luò】、破损及细胞有污染，请立即【jí】与我们电联。
所有动物细【xì】胞均视【shì】为有【yǒu】潜在的生物危【wēi】害性，必须在二级生物【wù】安全台内操作【zuò】，并请注意【yì】防【fáng】护，所有废液及接触过此细胞的器皿【mǐn】需【xū】要灭【miè】菌后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：人涎腺癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人涎腺癌细胞(ACC-M)运输和保存【cún】：使用含【hán】有胎牛【niú】血清的2ml冻存管【guǎn】发送【sòng】存【cún】活细胞。收到【dào】细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离【lí】心5min后，于洁净操作台弃去上清，加入推荐使【shǐ】用的培【péi】养基后转移至l〇cm培养皿或【huò】者T25培养瓶【píng】中培养，传代达到细【xì】胞生长状态良好时【shí】，再进行冻存。具体操作见细【xì】胞培养【yǎng】步骤。
细胞用途：仅供使用。