大鼠肝星形细胞（CFSC-8B）

大鼠肝星形细胞(CFSC-8B)
细胞介绍该细胞于原代末期冻存。
细胞特性
1)来源：大鼠肝脏
2)形态：贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请【qǐng】先【xiān】在【zài】显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口【kǒu】膜并将T25瓶置于37°C培养【yǎng】约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细【xì】胞长【zhǎng】满（90%以上）请及时进【jìn】行细【xì】胞传代，传代培养用6ml本公司【sī】附【fù】带的【de】*培【péi】养基。
5.接到细胞次日，请检查细【xì】胞【bāo】是否污染，若发现污【wū】染【rǎn】或疑似污染，请及【jí】时与【yǔ】我们取【qǔ】得电联。
 
大鼠肝星形细胞(CFSC-8B)细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备DMEM培养基【jī】(DMEM，GIBCO)，90%;胎【tāi】牛血清【qīng】，10%。
2. 培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温【wēn】度：37°C，培养箱湿【shī】度为【wéi】 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含有【yǒu】lmL细胞悬液的冻存管迅速放【fàng】入37°C水【shuǐ】浴中【zhōng】（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事【shì】先准【zhǔn】备【bèi】好的【de】含有4mL培养基的15ml离心管中混【hún】合均【jun1】匀。
在1000RPM条件下离心4分钟【zhōng】，弃去上清【qīng】液，加入lmL培养基后吹【chuī】匀。然后将所有细胞悬液移【yí】入含有【yǒu】5ml培养基【jī】的培养瓶中【zhōng】培养过【guò】夜。
第二天换液并检查细胞密度。
 
细胞【bāo】传代：如果细胞密度【dù】达【dá】80%-90%，即可进行【háng】传代培养。对于贴壁细胞，传代可【kě】参考【kǎo】以【yǐ】下方法：弃去培养上清，用【yòng】不含钙、镁离子的PBS润【rùn】洗细胞9-21次。
 力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中，置【zhì】于【yú】37°C培养箱中【zhōng】消【xiāo】化9-21分钟【zhōng】，然后【hòu】在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞【bāo】大部分变圆并【bìng】脱落【luò】，迅速拿回【huí】操作台，轻敲几【jǐ】下培养瓶后加入3ml此【cǐ】细胞的培养基终【zhōng】止消化。
轻轻吹【chuī】打后吸出，移入15ml离【lí】心管中，在1000RPM条件【jiàn】下离【lí】心【xīn】4分钟【zhōng】，弃去上清液，加【jiā】入lmL培养液后吹匀。
移入到【dào】事【shì】先准备【bèi】好的含有5ml培养基的T-25培养瓶【píng】中或含【hán】有14ml培养【yǎng】基的T-75培【péi】养瓶中培养。
细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。
贴壁【bì】细胞冻存时，先要【yào】消化处理并进行细胞计数。消化方法按照【zhào】细胞【bāo】传代方法的9-21步骤进【jìn】行，后的重悬液【yè】使用血清。悬浮【fú】细胞直【zhí】接计数【shù】后离心【xīn】，用血清重悬【xuán】浮【fú】，加DMSO至终浓度为【wéi】10%。
加入DMSO后迅速混匀，按每lml的数量分配到冻存管中。
本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
 
大鼠肝星形细胞(CFSC-8B)注意事项：
收到细胞后，若发【fā】现干冰己挥发干净【jìng】、冻存管瓶盖【gài】脱落、破损及细胞有污染，请【qǐng】立即与【yǔ】我【wǒ】们电【diàn】联【lián】。
所有动物细胞均【jun1】视为有潜在【zài】的生物危【wēi】害性，必须在二级生物安【ān】全【quán】台【tái】内操【cāo】作，并请注意【yì】防护，所【suǒ】有废液及接触过此细胞的器皿需要灭【miè】菌后方能丢弃【qì】。