人胃腺癌细胞 （AGS）

人胃腺癌细胞 (AGS)
细胞介绍：
细胞株源自一个未经治疗的切除肿瘤碎块。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备F12K培【péi】养基(F12K:SIGMA)，90%;胎牛血清，10%。
2.培养【yǎng】条【tiáo】件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度【dù】：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培【péi】养基，10%DMSO,现用【yòng】现配。液氮储【chǔ】存【cún】。
 
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞：将含有lmL细胞悬液的【de】冻【dòng】存管在37°C水【shuǐ】浴中迅速摇晃【huǎng】解【jiě】冻，加【jiā】入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下【xià】离心4分钟，弃去上【shàng】清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将【jiāng】所有细胞悬液加【jiā】入培养瓶中培养【yǎng】过夜（或将细胞悬【xuán】液【yè】加入l〇cm皿【mǐn】中，加【jiā】入约8ml培养基【jī】，培养过【guò】夜）。第二天换液并【bìng】检查细【xì】胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人胃腺癌细胞 (AGS)对于【yú】贴壁细胞【bāo】，传代【dài】可参考以下方法：弃去【qù】培养上清，用不【bú】含钙【gài】、镁离子【zǐ】的PBS润洗【xǐ】细胞9-21次。力口2m丨消化液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置【zhì】于【yú】37°C培养箱中消化【huà】9-21分钟【zhōng】，然后在显微【wēi】镜【jìng】下观察细胞消化【huà】情况，若细胞大部分变圆并【bìng】脱落，迅速拿回操作台【tái】，轻敲几下培养瓶后加少量培【péi】养基终止消化。按6-8ml/瓶【píng】补加培养基，轻轻打【dǎ】匀后【hòu】吸出，在【zài】1000RPM条件下【xià】离【lí】心4分钟，弃去上清【qīng】液，补加【jiā】l-2mL培养液后吹匀。将细【xì】胞【bāo】悬液按1: 2到1: 5的比例分【fèn】到新【xīn】的含8ml培养【yǎng】基的【de】新皿中或者瓶中。
 
细胞冻【dòng】存：待细【xì】胞生长【zhǎng】状态【tài】良好时，可进行【háng】细胞冻存。贴壁细【xì】胞冻存【cún】时，弃去培养基后【hòu】加入少【shǎo】量胰酶，细胞【bāo】变圆脱落后，加入约lml含血清的培【péi】养基后【hòu】加【jiā】入冻存管中，再添加1〇%DMSO后进行冻存【cún】。
 
注意事项：
收到细胞后，若【ruò】发现干冰己挥发【fā】干净、冻【dòng】存【cún】管瓶盖脱落、破损及细胞有【yǒu】污染，请【qǐng】立 即与我们电联【lián】。
所有动物细胞均视【shì】为有潜在的生物【wù】危【wēi】害性【xìng】，必须在【zài】二级生【shēng】物安【ān】全台内操【cāo】作，并请注 意防护，所有废液及接触过此细胞的器【qì】皿需要灭【miè】菌【jun1】后方能丢弃【qì】。
 
细胞特性：
1)来源：胃癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人胃腺癌细胞 (AGS)运输和【hé】保存：使【shǐ】用含有胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后， 可在【zài】1000RPM，常温【wēn】条件下，离心5min后，于【yú】洁净操作台【tái】弃【qì】去上清，加入【rù】推荐 使【shǐ】用的培养基后转移至l〇cm培养皿【mǐn】或者【zhě】T25培【péi】养瓶中培养，传代【dài】达【dá】到细胞生长 状态【tài】良好时，再进【jìn】行冻存。具体操作见细胞培养【yǎng】步骤。
细胞用途：仅供使用。