人胃癌细胞 （AZ521）

人胃癌细胞 (AZ521)
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 DMEM-H 培养基【jī】(DMEM-H，GIBCO,添【tiān】加 NaHC031.5g/L)， 90%;胎牛【niú】血清【qīng】，10%。（DMEM 液体培养基【jī】：GIBCO，11995-065)。
2.培【péi】养【yǎng】条件：气相【xiàng】：空【kōng】气，95%;二氧化碳，5%。温【wēn】度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现【xiàn】配。液氮【dàn】储存【cún】。
 
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞：将含有lmL细胞悬【xuán】液的冻存管在37°C水浴【yù】中迅速【sù】摇晃解【jiě】冻，加入【rù】4mL培养基【jī】混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补【bǔ】加【jiā】l-2mL培养基【jī】后【hòu】吹匀。然【rán】后将所【suǒ】有细胞【bāo】悬液【yè】加入【rù】培养瓶中培养过夜（或将细胞【bāo】悬液加入l〇cm皿中，加入约【yuē】8ml培【péi】养【yǎng】基，培养过夜）。第二天换液并检 查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

人胃癌细胞 (AZ521)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培【péi】养上清【qīng】，用不含钙、镁离子的【de】PBS润洗细胞9-21次。力口2m丨【shù】消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于【yú】37°C培【péi】养箱【xiāng】中消化9-21分钟【zhōng】，然后在显微镜下观察细胞【bāo】消化情况，若细胞【bāo】大部 分变圆并脱落，迅速拿回操作【zuò】台，轻敲几【jǐ】下【xià】培养瓶后加少量培养基终止消化【huà】。按6-8ml/瓶补加【jiā】培【péi】养【yǎng】基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条【tiáo】件下【xià】离心4分钟，弃【qì】去上清液，补【bǔ】加l-2mL培养液【yè】后吹匀。将细胞悬【xuán】液【yè】按1: 2到【dào】1: 5的【de】比例【lì】分到新的含【hán】8ml培养基的新皿中【zhōng】或者瓶中。
 
3)细胞冻存【cún】：待细胞生长【zhǎng】状态【tài】良好时，可进行【háng】细胞冻存。贴壁细胞冻【dòng】存时，弃【qì】去培养基后加【jiā】入少量胰酶，细【xì】胞【bāo】变圆【yuán】脱落后，加【jiā】入约【yuē】lml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加1〇%DMSO后进【jìn】行【háng】冻存。
 
注意事项：
收到细胞后，若发现【xiàn】干冰己挥发干净、冻【dòng】存【cún】管瓶盖脱落、破【pò】损及细胞有污染，请立即【jí】与【yǔ】我们电联【lián】。
所有动物细胞均【jun1】视【shì】为有潜在【zài】的生物危害性，必须在二级【jí】生物安全台内操作【zuò】，并请注【zhù】意防护，所有废【fèi】液及【jí】接触过【guò】此细胞的器【qì】皿【mǐn】需要灭菌后【hòu】方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：胃癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装

人胃癌细胞 (AZ521)运输和保【bǎo】存：使用【yòng】T25瓶充【chōng】液发送活细胞。收到细胞【bāo】后，请先【xiān】在显微镜下检查【chá】细胞生【shēng】长状态，并将T25瓶置于培养箱约【yuē】6h或【huò】过【guò】夜后，再次检查细胞状态。若状态良好，可【kě】进【jìn】行细胞后续处理【lǐ】操作，按照【zhào】以下方式进行。若发现可疑污染物，请及【jí】时与我们【men】取得【dé】电联【lián】。
细胞用途：仅供使用。