人胃腺癌细胞（BGC-823）

人胃腺癌细胞(BGC-823)
细胞介绍：
建自一位62岁的胃癌患者。
  
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO,，90%;胎牛【niú】血清，10%。
2.培养条件：气相：空气，95%;二【èr】氧化碳，5%。温度：37°C，培养箱湿【shī】度为【wéi】70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含有【yǒu】lmL细胞悬液的冻存管迅速放入37°C水浴中（水面【miàn】要低 于冻存【cún】管盖部）摇晃解冻【dòng】，移入事先准备【bèi】好【hǎo】的含有4mL培养【yǎng】基的15ml离心管中混合【hé】均匀。在【zài】1000RPM条件下【xià】离心4分钟【zhōng】，弃去上【shàng】清液，加入lmL培养基后【hòu】吹【chuī】匀。然后【hòu】将所有细胞悬液【yè】移【yí】入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换【huàn】液【yè】并检查细胞密度【dù】。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人胃腺癌细胞(BGC-823)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去【qù】培养上清，用不含钙、镁离【lí】子的PBS润洗细胞9-21次。力口【kǒu】2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中，置于37°C培养箱中消化9-21分【fèn】钟，然【rán】后【hòu】在显微镜下观察细【xì】胞【bāo】消化情况，若细胞【bāo】大部【bù】 分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后【hòu】加【jiā】入3ml此细胞【bāo】的 培养基终【zhōng】止消【xiāo】化【huà】。轻轻吹打【dǎ】后【hòu】吸出【chū】，移入【rù】15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培养液后吹匀。移入【rù】到【dào】事先准备好的含有5ml培养基的【de】T-25培【péi】养【yǎng】瓶中或【huò】含有14ml培养基【jī】的T-75培养瓶中【zhōng】培养。
 
细胞冻存：待细胞生长状态【tài】良好时，可进行【háng】细【xì】胞冻【dòng】存。贴壁细胞【bāo】冻存时，先要消化处理并【bìng】进行细胞计数。消化方法按照细【xì】胞传代方法的9-21步骤进行，后的重【chóng】悬【xuán】液使用【yòng】血【xuè】清【qīng】。悬浮细【xì】胞【bāo】直接计数【shù】后离心，用血清重悬浮，加DMSO至终浓【nóng】度为10%。加【jiā】入DMSO后【hòu】迅速混匀，按每lml的数量分配到冻存【cún】管中。本公司按【àn】每【měi】个冻【dòng】存管细胞【bāo】数目大于1X106个【gè】细胞冻存。
 
注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己挥发干净、冻存管【guǎn】瓶【píng】盖脱落、破损及细胞【bāo】有污染，请立即【jí】与【yǔ】我们电联。
所有动物【wù】细胞均视为有潜在的生【shēng】物危【wēi】害性，必须在二级生【shēng】物安【ān】全【quán】台内操作，并【bìng】请注【zhù】意防护，所有废液及接【jiē】触【chù】过此细胞的器皿需要灭【miè】菌【jun1】后方能丢弃。
  
细胞特性：
1)来源：胃癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人胃腺癌细胞(BGC-823)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请【qǐng】先【xiān】在【zài】显【xiǎn】微镜下确认【rèn】细胞生长【zhǎng】状态，去掉封口【kǒu】膜并将T25瓶置于37°C培养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4. 如果细【xì】胞【bāo】长满（90%以上【shàng】）请【qǐng】及时进行细胞传代，传代【dài】培养用6ml本公【gōng】司附【fù】带的*培【péi】养基。
5.接【jiē】到【dào】细胞次日，请【qǐng】检【jiǎn】查细胞是否污染，若发【fā】现污染【rǎn】或疑似污【wū】染【rǎn】，请及时与我们取得电联。
细胞用途：仅供使用。