人舌鱗状癌细胞 （CAL 27）

人舌鱗状癌细胞 (CAL 27)
细胞介绍：
该细胞系于1982年建立，从【cóng】一【yī】位56岁【suì】白种男性的病变舌中间部分取【qǔ】得，该【gāi】细胞具高密度颗粒状【zhuàng】胞浆。
 
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备【bèi】DMEM培养【yǎng】基(DMEM，GIBCO，，90%;胎牛血清，10%。
2.培养条【tiáo】件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度【dù】：37°C，培养箱湿度【dù】为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞【bāo】：将【jiāng】含有lmL细胞【bāo】悬液的冻存【cún】管迅速放入37°C水浴中（水面要低 于冻存【cún】管盖部）摇晃【huǎng】解【jiě】冻，移【yí】入事先【xiān】准备好的含有4mL培【péi】养基的15ml离心 管中混【hún】合均匀【yún】。在1000RPM条件下离心【xīn】4分【fèn】钟，弃【qì】去上清液，加入lmL培养基后吹匀。然后将所【suǒ】有细胞悬液移入含有5ml培养基的培【péi】养瓶中培养过夜。第二【èr】天换液并检查细【xì】胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人舌鱗状癌细胞 (CAL 27)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上【shàng】清，用不含【hán】钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。力口【kǒu】2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中，置于37°C培养箱中消化9-21分钟，然后在显微镜下观察细胞消化【huà】情【qíng】况，若细胞大部 分变圆并脱落，迅速拿【ná】回操作台【tái】，轻敲几下培【péi】养瓶【píng】后加入3ml此细胞的【de】培养基终止消化。轻【qīng】轻吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件下【xià】离【lí】心4分钟【zhōng】， 弃去【qù】上清液【yè】，加入lmL培养液【yè】后吹匀。移入到事【shì】先准备好的【de】含有5ml培养基的T-25培养瓶中【zhōng】或含有14ml培养基的T-75培养【yǎng】瓶中培养。
 
细胞冻【dòng】存：待细胞生【shēng】长【zhǎng】状态良好时，可进行【háng】细胞冻存。贴壁细胞冻存时【shí】，先要消化处理并进行细【xì】胞计数。消化方法【fǎ】按【àn】照细胞【bāo】传代方法的9-21步骤进行【háng】，后的重悬液使用血【xuè】清。悬【xuán】浮细胞直接【jiē】计【jì】数【shù】后【hòu】离【lí】心【xīn】，用【yòng】血清重悬浮，加DMSO至终浓度【dù】为10%。加入DMSO后【hòu】迅速混匀，按每lml的数量分配到冻存管中。本公司按每个【gè】冻存管细胞【bāo】数目大于1X106个细胞【bāo】冻存。
 
注意事项：
收到【dào】细胞【bāo】后，若发【fā】现干冰己挥发干【gàn】净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与【yǔ】我【wǒ】们电联。
所有动物细胞均视为有【yǒu】潜在的生【shēng】物危害【hài】性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意【yì】防护【hù】，所有废液及【jí】接触过此细【xì】胞【bāo】的器皿【mǐn】需要灭菌后【hòu】方能丢弃【qì】。
 
细胞特性：
1)来源：舌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人舌鱗状癌细胞 (CAL 27)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请【qǐng】先在显【xiǎn】微镜下确认细胞生长状态，去掉【diào】封口膜【mó】并将T25瓶置于【yú】37°C培养【yǎng】约 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细胞【bāo】长满【mǎn】（90%以上）请【qǐng】及时进【jìn】行细胞【bāo】传代，传【chuán】代培养【yǎng】用【yòng】6ml本公司附带的*培养基。
5.接到细【xì】胞次日，请检查细胞是否【fǒu】污染，若发现污染【rǎn】或疑似污【wū】染【rǎn】，请及【jí】时与我们取得电联。
细胞用途：仅供使用。