人组织细胞淋巴瘤细胞（U937）

人组织细胞淋巴瘤细胞(U937)
细胞介绍
该细胞是【shì】由Nilsson K实验【yàn】室于【yú】1974年从一名37岁的【de】患有恶性组织【zhī】细胞性淋【lín】巴瘤的白人男性的【de】胸水中分离建【jiàn】立的。1979年来的研究显示该【gāi】细【xì】胞在人混合淋巴【bā】细胞【bāo】培养物上清、佛【fó】波酯、VitD3、z-IFN、TNF和维A酸的诱导下可以向终【zhōng】末单核细胞分化【huà】。该细胞【bāo】不合成免【miǎn】疫球蛋白，EBV阴【yīn】性；可产生溶菌【jun1】酶【méi】、（9-21-微球蛋白【bái】，受PMA刺激后可【kě】产【chǎn】生TNF-ct;表达C3R;可作转染宿主；表【biǎo】达Fas，对【duì】TNF和抗Fas的抗体敏【mǐn】感。
 
细胞特性
1)来源：淋巴瘤
2)形态：单核细胞，悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保存：
使用T25瓶充液【yè】发送活细胞。收到细胞后【hòu】，请先在显【xiǎn】微镜下检【jiǎn】查细胞生【shēng】长状【zhuàng】态，并将T25瓶置于培养箱约【yuē】6h或过夜后，再次【cì】检查细【xì】胞状态。若【ruò】状态良好，可按照以下细胞培养步【bù】骤进行细胞后【hòu】续处理【lǐ】操作。若发现可疑【yí】污【wū】染物【wù】，请【qǐng】及时【shí】与我们取得电联。
细胞用途：仅供使用。
 
人组织细胞淋巴瘤细胞(U937)细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八【bā】,
D-葡萄糖【táng】2.5g八，丙酮【tóng】酸钠O.llg八【bā】)，90%;胎【tāi】牛血清，10%。
2.培【péi】养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培【péi】养箱湿度【dù】为【wéi】70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现【xiàn】用现配【pèi】。液氮储【chǔ】存。
2)细胞处理：
复苏细胞：
将含【hán】有lmL细胞悬液【yè】的【de】冻【dòng】存管在37°C水浴中迅【xùn】速摇晃【huǎng】解冻，加入4mL培养基混【hún】合均匀。在1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟【zhōng】，弃去上【shàng】清液【yè】，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞【bāo】悬液加【jiā】入培养瓶中培养过夜（或将
细胞悬液【yè】加入l〇cm皿【mǐn】中，加入约8ml培养基【jī】，培养过【guò】夜）。第二天【tiān】换液并检查细【xì】胞密度。细胞传代：如果细胞【bāo】密度达80%-90%，即可进行传代培【péi】养。
 
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法【fǎ】一：收集细胞【bāo】，1000RPM条件【jiàn】下离心4分【fèn】钟【zhōng】，弃去上清【qīng】液，补【bǔ】加l-2mL培养液后吹【chuī】匀，将细【xì】胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新【xīn】的含8ml培养基【jī】的新皿中或者瓶中【zhōng】。
方法二【èr】：可选择半数换液方式，弃去【qù】半数培养基后【hòu】，将剩【shèng】余细胞悬起，将细胞悬液按1: 2到1: 3的比【bǐ】例【lì】分到新【xīn】的【de】含8ml培养基的新皿中【zhōng】或者瓶中。
 
细胞冻存：待细胞生【shēng】长【zhǎng】状态【tài】良【liáng】好时【shí】，可【kě】进行细胞冻存。悬【xuán】浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条【tiáo】件下【xià】离心4分钟，少量保存上【shàng】清【qīng】液（防止细胞吸走)，加入部【bù】分【fèn】新鲜【xiān】培养基，加入到冻存管【guǎn】中，在冻存管中加入【rù】10%DMSO
后进行冻存。
 
人组织细胞淋巴瘤细胞(U937)注意事项：
收到【dào】细胞后，若发现【xiàn】干冰【bīng】己【jǐ】挥发干净、冻存管【guǎn】瓶盖脱落、破损及细胞有污【wū】染，请立即【jí】与【yǔ】我们电联。
所有动物细胞均视【shì】为【wéi】有潜【qián】在的生物危害性，必【bì】须【xū】在二【èr】级生物安全【quán】台内操作，并请注意防护，所有废液及【jí】接触过此细胞的器【qì】皿需要【yào】灭菌后方能丢【diū】弃。