人卵巢腺癌细胞（Caov-3）

人卵巢腺癌细胞(Caov-3)
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO, ,添【tiān】加NaHC031.5g八, D-葡萄糖【táng】2.5g八，丙酮【tóng】酸【suān】钠O.llg八)，90%;胎牛血【xuè】清，10%。
2. 培养条件：气相：空【kōng】气【qì】，95%;二氧化【huà】碳【tàn】，5%。温度：37摄氏【shì】度【dù】，培养箱 湿度【dù】为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养【yǎng】基，10%DMSO,现用【yòng】现配。液氮【dàn】储存。
 
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞：将含有lmL细胞悬【xuán】液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加入【rù】4mL培养基【jī】混【hún】合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培【péi】养【yǎng】基后吹【chuī】匀。然【rán】后【hòu】将【jiāng】所【suǒ】有细胞悬液【yè】加入培养瓶中培养【yǎng】过夜（或将细胞悬液加【jiā】入【rù】l〇cm皿中，加入约8ml培【péi】养【yǎng】基，培【péi】养过【guò】夜）。第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人卵巢腺癌细胞(Caov-3)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培【péi】养上清，用不含钙、镁离子的PBS润【rùn】洗细胞【bāo】9-21次【cì】。力【lì】口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中，置于37°C培养箱中消化9-21分【fèn】钟，然后在【zài】显微镜下观察细胞消化情况，若细【xì】胞大部【bù】 分变圆【yuán】并脱落【luò】，迅速拿回操作台【tái】，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。按6-8ml/瓶补【bǔ】加培养基，轻轻打匀后【hòu】吸出【chū】，在1000RPM条件下【xià】离心4分【fèn】钟，弃去上清液，补【bǔ】加l-2mL培养【yǎng】液后吹【chuī】匀。将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培【péi】养【yǎng】基【jī】的【de】新皿中或者【zhě】瓶【píng】中。
 
3)细胞【bāo】冻存：待细【xì】胞【bāo】生【shēng】长状态良好时，可进行细【xì】胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃【qì】去培【péi】养基后加入少量胰酶，细胞变【biàn】圆脱落后【hòu】，加入【rù】约lml含血清的培养基【jī】后加入冻存管中，再添【tiān】加1〇%DMSO后【hòu】进行冻存。
 
注意事项：
收到细胞后，若发现干冰【bīng】己【jǐ】挥发干净、冻【dòng】存管瓶盖脱落【luò】、破损及细胞有污【wū】染，请立即与我们【men】电联。
所有动物细【xì】胞均视为有潜【qián】在【zài】的生【shēng】物危害性，必须【xū】在二级生物安全台【tái】内操【cāo】作，并请注意防护，所有【yǒu】废液及接【jiē】触过此细胞的【de】器皿需要灭菌后方能丢弃【qì】。
 
人卵巢腺癌细胞(Caov-3)细胞特性：
1)来源：卵巢
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
运【yùn】输和【hé】保存【cún】：使【shǐ】用【yòng】T25瓶【píng】充液发送活细胞。收到细胞【bāo】后，请先在显微【wēi】镜下检查【chá】细胞生长状态，并将T25瓶置于培养箱约6h或过夜后，再次检查细【xì】胞状态。若状态良【liáng】好【hǎo】，可按【àn】照以【yǐ】下细胞培养步骤【zhòu】进行细胞后续处理操作。若【ruò】发现可【kě】疑污染物，请及时与我们取得电联。
细胞用途：仅供使用。