人神经母细胞瘤细胞（SK-N-SH）

人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)
细胞介绍：
SK-N-SH细胞系由j.L.Bieder建系【xì】，它与SK-N-MC所不【bú】同的是倍【bèi】增时【shí】间较长且多巴胺-(3-羟基【jī】酶【méi】水平较高。SK-N-SH在细胞【bāo】介导的细【xì】胞毒性【xìng】试验中用作靶细胞系【xì】。
 
细胞特性
1)来源：脑神经母细胞瘤，转移部位骨髓
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运【yùn】输和保存：可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方【fāng】式：（1)干冰【bīng】运输，收到后立即转【zhuǎn】入液氮冻存或【huò】直接复【fù】苏；（2)存【cún】活【huó】细胞，收到后应【yīng】继【jì】续生长，传代达到细胞生长状态良好时【shí】，再进行【háng】冻存。具体操作见细胞【bāo】培【péi】养步【bù】骤【zhòu】。
细胞用途：仅供使用。
 
人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备MEM培【péi】养基(MEM,GIBCO,添加NaHC031.5g八，丙酮【tóng】酸钠O.llg八)，90%;胎【tāi】牛【niú】血清【qīng】，10%。
2. 培养条件【jiàn】：气【qì】相【xiàng】：空气，95%;二氧【yǎng】化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱【xiāng】湿度【dù】为70%-80%。
3.冻存液【yè】：90%*培养基，10%DMSO,现【xiàn】用现配。液氮【dàn】储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将【jiāng】含有【yǒu】lmL细胞悬液的冻【dòng】存管【guǎn】在【zài】37°C水浴中迅速摇晃解冻，加【jiā】入4mL培养基混合均匀。在【zài】1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培【péi】养【yǎng】基后吹匀。然后将所【suǒ】有细【xì】胞悬液加入培【péi】养瓶中培养【yǎng】过夜（或将细胞悬液加入【rù】l〇cm皿中，加【jiā】入约【yuē】8ml培【péi】养基，培【péi】养【yǎng】过夜）。第【dì】二天换【huàn】液并检查细胞密度。细胞传代：如【rú】果【guǒ】细胞密度达80%-90%，即【jí】可进行传代【dài】培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培【péi】养上【shàng】清【qīng】，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。力【lì】口 2m丨消化【huà】液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中，置于37°C培养箱中【zhōng】消化【huà】9-21分钟，然后在显【xiǎn】微镜下观察【chá】细胞消化情【qíng】况，若细胞大部
按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀【yún】后【hòu】吸出，在1000RPM条【tiáo】件【jiàn】下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养【yǎng】液后吹匀。
将【jiāng】细胞悬【xuán】液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养【yǎng】基【jī】的新皿中或者瓶【píng】中。
 
细胞冻存：待细胞【bāo】生长状态良【liáng】好时，可进行【háng】细胞冻存【cún】。贴壁细胞冻存时【shí】，弃去【qù】培养基后【hòu】加【jiā】入少量胰【yí】酶，细胞变【biàn】圆脱落【luò】后，加入约lml含血清【qīng】的培养基【jī】后加入冻存管中，再添加1〇%DMSO后【hòu】进行冻存。
 
人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)注意事项：
收到细胞【bāo】后【hòu】，若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖【gài】脱【tuō】落、破损及细胞【bāo】有【yǒu】污染【rǎn】，请【qǐng】立即与我们电联。
所有动物细胞均【jun1】视为有潜【qián】在的生物危【wēi】害【hài】性，必须在二级生物安全台内【nèi】操【cāo】作，并请【qǐng】注意防护，所【suǒ】有废【fèi】液及接触过此【cǐ】细胞的器皿需【xū】要灭菌后方能丢弃。