人胰腺癌细胞（Capan-1）

人胰腺癌细胞(Capan-1)
细胞介绍：
该细胞来源于一【yī】位40岁白人男性患者的肝转移。细【xì】胞表【biǎo】达粘液素，Rh+，HLA A2,，A9，B13，B17。含有刺激素【sù】受体和乙二醇【chún】激素受体。
 
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】IMDM培养基【jī】（IMDM，GIBCO，80%;北美胎牛血 清(United States，GIBCO，货号16000-044)，20%。
2.培【péi】养条【tiáo】件【jiàn】：气相：空气，95%;二氧化【huà】碳【tàn】，5%。温度：37°C，培养箱湿度【dù】 为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复【fù】苏【sū】细胞：将【jiāng】含有lmL细胞悬液的冻存管迅【xùn】速放入37°C水浴【yù】中（水面要低 于冻【dòng】存【cún】管盖部【bù】）摇晃【huǎng】解冻，移【yí】入【rù】事【shì】先准【zhǔn】备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混【hún】合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培【péi】 养基后吹匀【yún】。然后将所【suǒ】有细【xì】胞悬液移【yí】入含有5ml培养【yǎng】基的培养瓶中培【péi】养过夜。第二天【tiān】换液【yè】并【bìng】检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人胰腺癌细胞(Capan-1)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去培养【yǎng】上清，用不含【hán】钙、镁离子的PBS润洗细胞【bāo】9-21次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养【yǎng】箱中消化9-21分钟，然后在显【xiǎn】微镜下观察【chá】细【xì】胞消化情况【kuàng】，若细胞大部 分【fèn】变圆并脱落，迅【xùn】速拿【ná】回【huí】操作台，轻敲几下培养瓶后加入【rù】3ml此细【xì】胞的 培养基【jī】终止消化。轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟， 弃去【qù】上【shàng】清【qīng】液，加入lmL培养液后吹匀。移【yí】入到事先【xiān】准备【bèi】好的【de】含【hán】有【yǒu】5ml培养基的【de】T-25培养瓶中或含有14ml培【péi】养基【jī】的T-75培养瓶中【zhōng】培【péi】养。
 
3)细【xì】胞【bāo】冻存：待细胞生长【zhǎng】状【zhuàng】态良好时，可【kě】进【jìn】行细【xì】胞冻存。贴壁细胞冻存时，先要消化处理【lǐ】并【bìng】进行细胞计数。消化【huà】方法【fǎ】按照细胞【bāo】传代方法的9-21步骤进行，后的重悬液【yè】使用血清。悬浮【fú】细胞【bāo】直接计数【shù】后离【lí】心，用血清重悬浮，加DMSO至终浓【nóng】度为10%。加入DMSO后迅速混【hún】匀，按【àn】每lml的数量【liàng】分配【pèi】到冻存【cún】管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个【gè】细胞冻存。
 
注意事项：
收到细【xì】胞后，若发现干冰【bīng】己挥发干【gàn】净【jìng】、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞【bāo】有污染，请立【lì】即与我们电联【lián】。
所有动物细胞均视为有潜在的【de】生物危害性，必须在二级生物安全台内【nèi】操【cāo】作，并请注意防【fáng】护，所有废液及接触过此【cǐ】细胞【bāo】的【de】器皿需要【yào】灭菌【jun1】后【hòu】方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：胰腺癌，肝转移
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人胰腺癌细胞(Capan-1)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显【xiǎn】微【wēi】镜下确认【rèn】细胞生【shēng】长状态，去掉封口膜并将【jiāng】T25瓶置于37°C培养【yǎng】约【yuē】 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4. 如果【guǒ】细【xì】胞长满【mǎn】（90%以上）请及时进行细胞传代【dài】，传代培【péi】养用6ml本【běn】公司附带的*培【péi】养基。
5.接到【dào】细胞次日【rì】，请【qǐng】检查【chá】细胞是否【fǒu】污染【rǎn】，若发现污染或疑似污【wū】染，请及时与我们取【qǔ】得电联。
细胞用途：仅供使用。