绵羊肺细胞（OAR-L1）

绵羊肺细胞(OAR-L1)
细胞介绍：
该【gāi】细胞【bāo】系来源于一雌性绵【mián】羊的肺组【zǔ】织。1990年由中国【guó】科学院昆明细胞库建立【lì】。
 
细胞特性
1)来源：绵羊肺
2)形态：成纤维细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微镜下确【què】认细胞生长状态【tài】，去掉【diào】封【fēng】口【kǒu】膜【mó】并将T25瓶置于37°C培养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果【guǒ】细胞长【zhǎng】满（90%以【yǐ】上）请及时进行细胞传代，传【chuán】代培养用6ml本公司附带【dài】的*培【péi】养基。
5.接到【dào】细胞次日，请检查【chá】细胞是否污染，若发现污染【rǎn】或疑【yí】似污【wū】染，请【qǐng】及时【shí】与我们取得电联。
细胞用途：仅供使用。

绵羊肺细胞(OAR-L1)本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 McCOY's 5A 培养基【jī】(McCOY's 5A，GIBCO)，90%;胎牛【niú】血清，10%。
2. 培养条件【jiàn】：气相：空气，95%;二氧【yǎng】化碳【tàn】，5%。温【wēn】度：37°C，培养箱湿度为【wéi】 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞：将含有lmL细胞【bāo】悬液的冻存【cún】管迅速【sù】放入37°C水浴中（水【shuǐ】面要低【dī】于冻存【cún】管盖部）摇晃【huǎng】解冻，移入事先准备【bèi】好的含【hán】有4mL培养【yǎng】基的【de】15ml离心管【guǎn】中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃去上清【qīng】液，加入lmL培
养基后【hòu】吹匀。然后将所有细胞悬液移入【rù】含有5ml培养基【jī】的培养瓶中培【péi】养【yǎng】过【guò】夜。
第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去培养上【shàng】清，用不含【hán】钙、镁离子【zǐ】的PBS润【rùn】洗细胞9-21次【cì】。力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中，置于37°C培养箱中消化9-21分钟【zhōng】，然后在显微镜下观察细胞消【xiāo】化【huà】情【qíng】况，若【ruò】细胞大部
分变圆【yuán】并脱落，迅【xùn】速拿【ná】回操【cāo】作台，轻敲几下培养瓶后加【jiā】入3ml此细胞【bāo】的培养基终止消【xiāo】化。轻轻吹【chuī】打【dǎ】后吸出，移【yí】入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃【qì】去上【shàng】清液，加入lmL培养液【yè】后吹【chuī】匀。
移【yí】入【rù】到事先准备好的含有5ml培养基的【de】T-25培养【yǎng】瓶【píng】中或含有【yǒu】14ml培养【yǎng】基的T-75培养瓶中培养。
 
细胞冻存：待细【xì】胞生长状态【tài】良好时，可【kě】进行细【xì】胞冻存。贴【tiē】壁细胞冻【dòng】存时，先要消【xiāo】化处理并进行细胞计数。消化方法【fǎ】按照细胞传【chuán】代方法的9-21步【bù】骤进行，后的重【chóng】悬液使【shǐ】用血清。悬浮细胞直【zhí】接计数后离【lí】心，用【yòng】血清重悬浮，加DMSO
至终浓【nóng】度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每lml的数量分配到冻存管【guǎn】中。本公【gōng】司按每个【gè】冻存管细【xì】胞数【shù】目大于1X106个细【xì】胞【bāo】冻【dòng】存。
 
绵羊肺细胞(OAR-L1)注意事项：
收到细胞【bāo】后，若发现【xiàn】干冰己挥发【fā】干净、冻存【cún】管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与【yǔ】我们电【diàn】联。
所有【yǒu】动物细胞均视为有潜在的【de】生物危害性，必须【xū】在二级生物安全台内操作，并【bìng】请【qǐng】注【zhù】意防护【hù】，所有废液及接触过此细胞的器皿需【xū】要灭菌【jun1】后方能【néng】丢弃【qì】。