人肺癌细胞（NCI-H2126）

人肺癌细胞(NCI-H2126)
细胞特性：
1)来源：肺癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保【bǎo】存：使用含有胎牛血清【qīng】的2ml冻【dòng】存管发送存活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台【tái】弃去上清【qīng】，加【jiā】入推【tuī】荐使用的培养基后转移至【zhì】l〇cm培【péi】养皿或者T25培养瓶中培养【yǎng】，传代达细【xì】胞生【shēng】长状态【tài】良好时，再【zài】进【jìn】行冻存。具【jù】体操【cāo】作见细胞培养步【bù】骤。
 
细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 DMEM/F12 培养基(DMEM/F12，GIBCO)，85%;胎【tāi】牛血清，5%，添【tiān】加5ug/mL胰岛素，0.01mg/mL转铁蛋白，lOnMe-雌【cí】二醇，2mML-谷氨酰胺。
2.培养条件【jiàn】：气【qì】相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏【shì】度【dù】，培养箱湿度为70%-80%。
3. 冻存液：90%*培养【yǎng】基【jī】，10%DMSO,现【xiàn】用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞【bāo】：将含有lmL细胞悬【xuán】液的【de】冻【dòng】存管在【zài】37°C水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基【jī】混合均匀。在1000RPM条件下离心【xīn】4分【fèn】钟，弃去上清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所【suǒ】有细胞【bāo】悬【xuán】液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液【yè】加入l〇cm皿【mǐn】中，加入约8ml培养基【jī】，培养过夜）。第二天换液并检【jiǎn】查细胞【bāo】密度。细【xì】胞传代【dài】：如果细胞【bāo】密【mì】度达80%-90%，即可进行传代培【péi】养【yǎng】。
 
人肺癌细胞(NCI-H2126)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。
力口 2m丨消化液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中，置于37°C培养箱中消【xiāo】化9-21分钟【zhōng】，然后在显微镜下观【guān】察细胞消化情况，若细胞【bāo】大部分变圆并脱落，迅速拿回操作【zuò】台【tái】，轻【qīng】敲几下培养瓶后加少量【liàng】培【péi】养【yǎng】基【jī】终止消化。
按6-8ml/瓶补加培养【yǎng】基【jī】，轻轻【qīng】打匀【yún】后吸出，在1000RPM条件下离心【xīn】4分钟【zhōng】，弃去上清液，补加l-2mL培养【yǎng】液后吹匀。将细胞悬液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到新的含【hán】8ml培养基的新皿中【zhōng】或者瓶中。
 
细胞冻存：待细胞生长状【zhuàng】态良好时【shí】，可进行细胞冻【dòng】存。贴【tiē】壁细胞冻存【cún】时，弃【qì】去【qù】培养基后加入少【shǎo】量胰【yí】酶，细胞变圆【yuán】脱落后，加入约lml含血【xuè】清的培养基后加入冻存管【guǎn】中【zhōng】，再添加1〇%DMSO后进行冻存。
 
人肺癌细胞(NCI-H2126)注意事项：
收【shōu】到【dào】细胞后，若发现干【gàn】冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落【luò】、破【pò】损及细胞有污染，请立即【jí】与【yǔ】我们电联。
所有动【dòng】物细胞均【jun1】视为有潜在的生物危害性【xìng】，必须在二级生物安全台【tái】内操【cāo】作【zuò】，并请【qǐng】注【zhù】意防护，所有废液及【jí】接触过此细胞的器【qì】皿【mǐn】需要灭菌后方能丢弃。