人急性淋巴细胞白血病细胞 （CEM/C1）

人急性淋巴细胞白血病细胞 (CEM/C1)
细胞介绍：
CEM/C1是【shì】人【rén】T细胞白血病细【xì】胞株CCRF-CEM具【jù】有【yǒu】喜树【shù】碱抗【kàng】性的【de】衍生株。1991年细胞【bāo】株选择【zé】并【bìng】亚克隆了对CPT的抗性。细胞表现出对【duì】CPT类似物水溶性的托泊替康和【hé】非水溶性的9-氨基丁【dīng】及10,11-亚【yà】甲二氧基丁具有交【jiāo】叉抗性。〔日【rì】1/1/(：1细胞【bāo】对CPT的敏感性较母系CEM细胞低31倍。CEM/C1细胞表现非典【diǎn】型的多药抗【kàng】性和转换【huàn】拓补异构酶催【cuī】化活性。对CPT的抗性维持【chí】6个月以上。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培【péi】养【yǎng】基【jī】(RPIVM-1640:GIBCO,添加【jiā】 NaHC031.5g八, D-葡萄糖2.5g八，丙酮酸钠O.llg八)，90%;胎牛血清【qīng】，10%。
2. 培养条【tiáo】件【jiàn】：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度【dù】为【wéi】70%-80%。
3.冻存【cún】液：90%*培【péi】养基，10%DMSO,现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞：将含有lmL细胞悬液【yè】的冻存管在37°C水浴中迅速【sù】摇晃解【jiě】冻，加入【rù】4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心【xīn】4分钟，弃【qì】去【qù】上清【qīng】液，补加l-2mL培养基【jī】后吹匀。然后将所【suǒ】有细胞悬液【yè】加入培养瓶中培【péi】养过夜【yè】（或将细胞悬液【yè】加入【rù】l〇cm皿中，加入约8ml培【péi】养基，培养过【guò】夜）。第二天换液并【bìng】检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人急性淋巴细胞白血病细胞 (CEM/C1)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培【péi】养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。力口 2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶【píng】中，置【zhì】于37°C培【péi】养箱中消【xiāo】化9-21分钟，然后在显微镜下观察细胞【bāo】消化情况，若细【xì】胞大部 分变圆并【bìng】脱落，迅速拿回操【cāo】作台，轻【qīng】敲几下培养【yǎng】瓶后加少量培养基终止 消化。按【àn】6-8ml/瓶补【bǔ】加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟【zhōng】，弃去上清【qīng】液，补加【jiā】l-2mL培养液【yè】后【hòu】吹匀。将细胞悬【xuán】液按1: 2到【dào】1: 5的比【bǐ】例分到新的含【hán】8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一【yī】：收集细【xì】胞，1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液【yè】后【hòu】吹匀，将细胞悬液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到新的含8ml培【péi】养基【jī】的【de】新皿中【zhōng】或者瓶中。
方法【fǎ】二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余【yú】细胞悬起【qǐ】，将【jiāng】细【xì】 胞【bāo】悬液【yè】按【àn】1: 2到1: 3的比例【lì】分到新的含8ml培养基的【de】新皿中或者瓶中。
细胞冻【dòng】存：待细胞生长状态良好时，可进行细【xì】胞【bāo】冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量【liàng】胰酶，细胞变圆【yuán】脱落后，加【jiā】入约lml含血【xuè】清的培养基后【hòu】加入冻存管中，再添加【jiā】1〇%DMSO后进行冻存【cún】。悬浮细胞冻存时，应【yīng】将细胞 收集，1000RPM条件下【xià】离【lí】心【xīn】4分钟，少量保存上清【qīng】液（防止【zhǐ】细胞吸走【zǒu】)，加【jiā】入部分新鲜【xiān】培【péi】养基，加入到【dào】冻存管中，在冻存管中加入1〇%DMSO后进行冻【dòng】 存。
 
人急性淋巴细胞白血病细胞 (CEM/C1)注意事项：
收【shōu】到细胞后【hòu】，若发现【xiàn】干冰【bīng】己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破【pò】损及细胞有污染，请立即【jí】与我们【men】电联。
所【suǒ】有动物细胞均视为有潜【qián】在的生物危害性，必【bì】须在二级生物【wù】安全台内操作，并请【qǐng】注意防【fáng】护，所有【yǒu】废液及【jí】接触【chù】过此细胞的器【qì】皿需要【yào】灭菌后方能丢弃【qì】。
 
细胞特性：
1)来源：器官：外周血疾病：急【jí】性淋巴细胞白血病细胞类型【xíng】:T淋【lín】巴【bā】母细胞【bāo】
2)形态：淋巴母细胞
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保存：可选择干冰运输及发送复苏【sū】存活细【xì】胞方式：（1)干冰运输【shū】，收到【dào】后立【lì】即转入液氮【dàn】冻存或直接复苏；（2)存活细【xì】胞，收【shōu】到【dào】后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时【shí】，再【zài】进行【háng】冻存。具【jù】体【tǐ】操【cāo】作【zuò】见细【xì】胞培【péi】养步骤。
细胞用途：仅供使用。