人非小细胞 肺癌细胞（NCI-H1915）

人非小细胞 肺癌细胞(NCI-H1915)
细胞介绍：
该细胞株建于1988年4月，源于一个脑转移病人。
 
细胞特性
1)来源：肺癌，脑转移
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保存：使用含有胎牛血清【qīng】的【de】2ml冻存【cún】管【guǎn】发送存活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条【tiáo】件下，离心【xīn】5min后【hòu】，于洁净操作台弃去【qù】上清，加入推荐使用的【de】培养基后转【zhuǎn】移至l〇cm培养皿或者【zhě】T25培养瓶【píng】中【zhōng】培【péi】养，传代【dài】达到细【xì】胞生长状态良好时，再【zài】进行【háng】冻【dòng】存。具体操作见细胞培养步骤。
 
人非小细胞 肺癌细胞(NCI-H1915)细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养【yǎng】基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八,D-葡【pú】萄糖2.5g八，丙酮酸钠O.llg八【bā】)，90%;胎牛血清，10%。
2. 培养条件【jiàn】：气相【xiàng】：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养【yǎng】湿【shī】度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培【péi】养基，10%DMSO,现用现配。液氮【dàn】储【chǔ】存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬【xuán】液【yè】的【de】冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培【péi】养基混【hún】合均匀。在1000RPM条【tiáo】件下离心4分钟，弃去【qù】上清液【yè】，补【bǔ】加l-2mL培【péi】养基后吹匀。然后将所【suǒ】有细【xì】胞【bāo】悬液【yè】加入【rù】培养瓶【píng】中【zhōng】培养过夜（或将
细【xì】胞悬液加入l〇cm皿【mǐn】中，加入约8ml培养基【jī】，培养【yǎng】过夜【yè】）。第二天换【huàn】液并检查细胞密【mì】度【dù】。细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进【jìn】行【háng】传【chuán】代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养【yǎng】上【shàng】清，用【yòng】不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中，置【zhì】于37°C培养箱中消化9-21分钟【zhōng】，然后【hòu】在【zài】显【xiǎn】微镜【jìng】下【xià】观察细胞消化【huà】情况，若【ruò】细胞【bāo】大部【bù】分变圆【yuán】并【bìng】脱落，迅速拿操作台，轻【qīng】敲几【jǐ】下培【péi】养瓶后加少量培养基终止按6-8ml/瓶补加培养基，轻【qīng】轻【qīng】打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃【qì】去上清液，补【bǔ】加l-2mL培养液后吹匀。
将细【xì】胞悬液【yè】按1: 2到1: 5的比例分到新【xīn】的含8ml培养【yǎng】基【jī】的新皿中或者瓶【píng】中。
 
细胞冻【dòng】存：待细胞生长【zhǎng】状态良好时【shí】，可【kě】进行细胞【bāo】冻存。贴壁细胞冻存时，弃【qì】去培养基后【hòu】加入少量胰酶，细胞变【biàn】圆脱落后【hòu】，加入【rù】约【yuē】lml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加【jiā】1〇%DMSO后进行冻存。
 
人非小细胞 肺癌细胞(NCI-H1915)注意事项：
收到细胞【bāo】后，若发【fā】现干冰己挥发干净【jìng】、冻存管【guǎn】瓶盖【gài】脱落、破【pò】损及细胞有【yǒu】污染，请立即与我们电联。
所有动物细胞均视【shì】为有潜在的生物危害性，必须在【zài】二级生物安【ān】全台内【nèi】操作，并请注意防【fáng】护，所有废【fèi】液及接触过【guò】此细胞的【de】器【qì】皿需【xū】要【yào】灭菌后方能丢弃。