人经典小细胞肺癌细胞（NCI-H1688）

人经典小细胞肺癌细胞(NCI-H1688)
细胞介绍：
该细胞来源于一位治疗之前的患者的肝转移灶。
 
细胞特性
1)来源：肺；经典小细胞肺癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在【zài】显微镜【jìng】下确认【rèn】细【xì】胞生长状态，去【qù】掉封【fēng】口膜并将T25瓶置于37°C培养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如【rú】果细胞【bāo】长【zhǎng】满【mǎn】（90%以上）请及时进行细胞传代，传代培养用6ml本【běn】公司【sī】附【fù】带的*培养基。
5.接到细胞次日，请检查细胞是否【fǒu】污【wū】染【rǎn】，若【ruò】发现【xiàn】污染或疑似污染【rǎn】，请【qǐng】及时与我们【men】取得电联。细胞用【yòng】途：仅供使用。
 
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO)，90%;胎【tāi】牛血【xuè】清，10%。
2.培【péi】养条件：气【qì】相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培【péi】养箱湿【shī】度为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。

2)细胞处理：

复苏【sū】细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管迅速放入37°C水浴【yù】中（水面要低于冻存管盖部【bù】）摇晃解冻【dòng】，移入事【shì】先准备好的含有4mL培养【yǎng】基的15ml离【lí】心管中混合均匀。在【zài】1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃去【qù】上清液，加【jiā】入lmL培养基后吹匀。然后将所【suǒ】有细胞悬【xuán】液移入含【hán】有【yǒu】5ml培【péi】养【yǎng】基的培养瓶【píng】中【zhōng】培养过夜。第二天换【huàn】液并【bìng】检查细【xì】胞密度。细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可【kě】进行传代培养。
 
人经典小细胞肺癌细胞(NCI-H1688)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙【gài】、镁离【lí】子的【de】PBS润洗细【xì】胞9-21次。力口 2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置【zhì】于37°C培养箱【xiāng】中消化【huà】9-21分钟，然后在显【xiǎn】微镜下观察细【xì】胞消化情况，若【ruò】细胞大部
分变圆并脱落【luò】，迅速拿回操作台，轻敲几下【xià】培养【yǎng】瓶后加入【rù】3ml此细胞的培【péi】养基终止消【xiāo】化。
轻轻吹打【dǎ】后吸出，移入15ml离心【xīn】管【guǎn】中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培养液后吹匀移【yí】入到事【shì】先准备【bèi】好的含有5ml培【péi】养【yǎng】基的【de】T-25培【péi】养瓶中【zhōng】或【huò】含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。
 
细胞冻存：待【dài】细胞生【shēng】长状态良好时，可进行细胞冻存。贴【tiē】壁细胞冻存【cún】时【shí】，先要消【xiāo】化处理并进行细胞【bāo】计数。消化方【fāng】法【fǎ】按照细胞传代方法的【de】9-21步【bù】骤进行，后【hòu】的重悬液使用血清。悬【xuán】浮细胞直接计数后离【lí】心，用血清重【chóng】悬浮，加DMS至终浓度为10%。加入DMSO后【hòu】迅速混【hún】匀，按每lml的数量分配【pèi】到冻存管中【zhōng】。本公司按每【měi】个冻存【cún】管细胞【bāo】数目【mù】大于1X106个细胞冻【dòng】存。
 
人经典小细胞肺癌细胞(NCI-H1688)注意事项：
收到细胞后【hòu】，若发现【xiàn】干冰己挥发干净、冻存管【guǎn】瓶盖脱落【luò】、破损及细胞有污染【rǎn】，请【qǐng】立即与我们【men】电联。
所有【yǒu】动【dòng】物细胞均视为有潜在【zài】的生物危害【hài】性，必须在二级生物安全台【tái】内操作【zuò】，并请注意防护，所有废【fèi】液及【jí】接触过【guò】此细胞的器【qì】皿需【xū】要灭菌后方【fāng】能丢弃。