人鼻咽癌细胞（CNE1）

人鼻咽癌细胞(CNE1)
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO,90%;胎牛
血清，10%。
2.培养条件：气相：空气，95%;二【èr】氧化碳，5%。温度：37摄氏【shì】度，培【péi】养箱湿度为70%-80%。
3.冻【dòng】存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液【yè】氮储存【cún】。
 
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞：将【jiāng】含【hán】有lmL细胞悬【xuán】液的冻存管在37°C水浴中迅【xùn】速摇【yáo】晃解冻，加入4mL培养基【jī】混合均匀。在【zài】1000RPM条【tiáo】件下【xià】离心4分钟【zhōng】，弃去【qù】上清液【yè】，补加【jiā】l-2mL培养基后【hòu】吹匀。然【rán】后【hòu】将所有细胞悬液加入【rù】培养【yǎng】瓶中培养过夜（或将细胞悬液加【jiā】入l〇cm皿中，加入约8ml培养【yǎng】基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞【bāo】密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人鼻咽癌细胞(CNE1)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去培养上清，用不含钙、镁离【lí】子【zǐ】的PBS润【rùn】洗细胞9-22次。力口2m丨消化液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶【píng】中，置于37°C培养箱中消化9-22分【fèn】钟，然后在显微镜下观察【chá】细【xì】胞消化【huà】情况【kuàng】，若细胞大【dà】部 分【fèn】变圆【yuán】并脱落，迅速拿回操作台【tái】，轻敲几下培养【yǎng】瓶后【hòu】加少量培【péi】养基【jī】终【zhōng】止 消化。按6-8ml/瓶补【bǔ】加培养【yǎng】基，轻轻打后吸出，在1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培【péi】养液后吹【chuī】匀。将细胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的比例分到新的含【hán】8ml培【péi】养基的新皿中或者瓶中。
 
3)细【xì】胞冻存：待细【xì】胞生【shēng】长【zhǎng】状态良好时，可进行【háng】细胞冻存。贴壁细胞冻【dòng】存时【shí】，弃去培【péi】养基【jī】后加入少量胰酶，细胞【bāo】变【biàn】圆脱落后，加入约【yuē】lml含血【xuè】清的培养基后加入冻存管中，再【zài】添加1〇%DMSO后进行冻存。
 
注意事项：
收【shōu】到细胞后【hòu】，若发现干冰己挥【huī】发干净、冻存【cún】管瓶盖脱落、破损及细胞【bāo】有污染，请立即与我【wǒ】们电联。
所有动物细胞均视为【wéi】有潜在的【de】生物危害性，必须在二级生【shēng】物安全台内操作【zuò】，并请注意【yì】防【fáng】护，所有废液【yè】及接触过此细胞的器【qì】皿需【xū】要灭菌【jun1】后【hòu】方能丢弃。
 
人鼻咽癌细胞(CNE1)细胞特性：
1)来源：鼻咽癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
运输【shū】和【hé】保存：使用T25瓶【píng】充【chōng】液发送活细胞。收到细胞后，请先在显微镜下检【jiǎn】查细胞【bāo】生长状态，并将T25瓶置于培养箱约6h或【huò】过夜后，再次【cì】检查细胞【bāo】状态。若状态良好，可进行细胞【bāo】后续处【chù】理操【cāo】作【zuò】，按【àn】照以下方式进行。若发现可疑污【wū】染物，请及时与【yǔ】我们取得电联。
细胞用途：仅供使用。