人鼻咽癌细胞（CNE2）

人鼻咽癌细胞(CNE2)
细胞介绍：
该CNE2细胞系为低分化鼻咽鳞状细胞癌细胞系。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基【jī】(RPMI-1640:GIBCO,90%;胎牛
血清，10%。
2. 培【péi】养【yǎng】条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄【shè】氏度，培养箱【xiāng】湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养【yǎng】基，10%DMSO,现【xiàn】用现配。液【yè】氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含有lmL细胞【bāo】悬液的冻存管在37°C水浴【yù】中迅速摇晃解【jiě】冻，加入【rù】4mL培养基混合均【jun1】匀【yún】。在1000RPM条件下离心4分钟，弃【qì】去上清液【yè】，补加l-2mL培养基后【hòu】吹匀。然后将【jiāng】所有细胞【bāo】悬液加入培养瓶中培养过【guò】夜（或将细胞悬液加入【rù】l〇cm皿中，加入约8ml培养基【jī】，培养【yǎng】过夜【yè】）。第二【èr】天【tiān】换液并检查细胞【bāo】密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人鼻咽癌细胞(CNE2)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去【qù】培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗【xǐ】细胞9-22次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养【yǎng】瓶中，置于37°C培【péi】养箱中消化9-22分【fèn】钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部 分变圆并脱落，迅【xùn】速拿回操作台，轻敲几下培养【yǎng】瓶后【hòu】加【jiā】少【shǎo】量培【péi】养【yǎng】基终止 消【xiāo】化。按【àn】6-8ml/瓶补加【jiā】培【péi】养基，轻轻打匀后【hòu】吸出，在1000RPM条件下离心4分钟【zhōng】，弃去上【shàng】清液，补【bǔ】加l-2mL培【péi】养【yǎng】液【yè】后吹匀。将细胞悬液按【àn】1: 2到1: 5的比例分到新的【de】含8ml培【péi】养基的新皿中或者瓶【píng】中【zhōng】。
细【xì】胞冻存：待细胞生长状态良【liáng】好时【shí】，可进行细【xì】胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养【yǎng】基后加入少量胰酶，细胞变【biàn】圆脱落【luò】后，加入约lml含血清的培养基【jī】后加入【rù】冻存管中，再添【tiān】加1〇%DMSO后【hòu】进行冻【dòng】存【cún】。
 
注意事项：
收到【dào】细胞后，若【ruò】发【fā】现干【gàn】冰【bīng】己挥发干净、冻存管【guǎn】瓶盖脱落、破损【sǔn】及细胞【bāo】有污染，请立即与我们电联。
所【suǒ】有动物【wù】细【xì】胞均视为有潜在的生物危害性，必须【xū】在二级生物安全台【tái】内操【cāo】作，并请注【zhù】意【yì】防护，所有废液及【jí】接触过此细胞的【de】器皿需要灭菌后方能丢【diū】弃。
 
人鼻咽癌细胞(CNE2)细胞特性：
1)来源：鼻咽癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保【bǎo】存【cún】：使【shǐ】用T25瓶充液发【fā】送活细胞。收到细胞后，请【qǐng】先在显微镜下【xià】检查细胞生长状【zhuàng】态，并将T25瓶【píng】置于培养【yǎng】箱约6h或过【guò】夜后，再次检查【chá】细胞状【zhuàng】态。若状【zhuàng】态良好【hǎo】，可进行细【xì】胞后续处理操作，按照以下方式进【jìn】行。若发现可疑【yí】污染物，请及时与我们取得电联。
细胞用途：仅供使用。