人非小细胞肺癌细胞（NCI-H524）

人非小细胞肺癌细胞(NCI-H524)
细胞介绍：
该细胞1982年建系，源自非小细胞肺癌男性患者的转移淋巴结。
 
细胞特性
1)来源：肺癌
2)形态：圆形，悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格【gé】：T25瓶或【huò】者lmL冻【dòng】存管包装运输和保存：可【kě】选择干冰运输【shū】及发送复苏存活细胞方式：（1)干冰运【yùn】输，收到后立即【jí】转入【rù】液氮冻存或【huò】直接复苏；（2)存【cún】活细胞，收【shōu】到后应继续生长，传代达到【dào】细胞生长状态【tài】良好时，再进行【háng】冻存。具【jù】体操作见细胞培养【yǎng】步【bù】骤【zhòu】。
 
细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基【jī】(RPMI-1640:GIBCO)，90%;胎牛【niú】血清，10%。
2.培养条件【jiàn】：气相：空【kōng】气，95%;二氧化碳，5%。温度【dù】：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现【xiàn】用现配。液【yè】氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞【bāo】：将【jiāng】含有lmL细胞悬液【yè】的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养【yǎng】基【jī】混合均匀。在【zài】1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补【bǔ】加l-2mL培养基后【hòu】吹匀。然后将【jiāng】所有细胞悬液【yè】加【jiā】入【rù】培养瓶中【zhōng】培养过【guò】夜（或【huò】将细【xì】胞悬液【yè】加入l〇cm皿【mǐn】中，加入约8ml培养基【jī】，培养过夜）。第二【èr】天换液并【bìng】检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人非小细胞肺癌细胞(NCI-H524)对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下【xià】离心4分钟，弃去上清液，补【bǔ】加l-2mL培养【yǎng】液【yè】后吹匀，将细胞悬液【yè】按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培【péi】养基的新皿【mǐn】中或者【zhě】瓶【píng】中。
方法二：可选择半数【shù】换液【yè】方式，弃去半【bàn】数【shù】培养基【jī】后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液【yè】按1: 2到1: 3的比【bǐ】例分到【dào】新的含8ml培【péi】养基的【de】新皿中或者瓶中。
 
细【xì】胞冻【dòng】存【cún】：待细胞生长【zhǎng】状态良好时【shí】，可进行细胞【bāo】冻存。悬浮细胞【bāo】冻存时，应将细胞【bāo】收集，1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，少量保存上清液（防止【zhǐ】细【xì】胞吸走)，加入部分新鲜【xiān】培养【yǎng】基，加入到【dào】冻存管中，在冻【dòng】存管【guǎn】中加入10%DMSO后进行冻存。
 
人非小细胞肺癌细胞(NCI-H524)注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己【jǐ】挥发干净、冻存管【guǎn】瓶盖脱落、破损及细胞有【yǒu】污【wū】染，请【qǐng】立即与【yǔ】我们电联。
所有动【dòng】物【wù】细【xì】胞均视为【wéi】有潜【qián】在的【de】生物危害【hài】性，必须在二级生物【wù】安全台内操【cāo】作，并请注【zhù】意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需【xū】要灭菌后方能丢弃。