人卵巢癌细胞（CoCl）

人卵巢癌细胞 (CoCl)
细胞介绍：
CoCl细【xì】胞建系于【yú】1993年（熊世钢等【děng】）。细胞【bāo】于原代培养至第【dì】17天*传代，以后反复传代【dài】，生物学特性稳定。可表达多种肿瘤标【biāo】志物和野【yě】生型P53蛋白【bái】、突变【biàn】型P53蛋白。裸鼠接种【zhǒng】产生分化差的腺癌【ái】。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640培养基(RPIVM-1640:GIBCO,,添加 NaHC031.5g八, D-葡萄糖【táng】2.5g八，丙酮酸钠【nà】O.llg八【bā】)，90%;胎牛血清，10%。
2.培养【yǎng】条【tiáo】件：气相：空气【qì】，95%;二氧【yǎng】化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿【shī】度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液氮【dàn】储【chǔ】存【cún】。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬液【yè】的【de】冻存管在37°C水浴中【zhōng】迅速【sù】摇晃解冻，加【jiā】入4mL培养基混【hún】合均匀。在1000RPM条件【jiàn】下离心【xīn】4分钟，弃【qì】去上清液【yè】，补加l-2mL培【péi】养基后吹匀。然后将所【suǒ】有细胞悬液加入培【péi】养瓶【píng】中培养【yǎng】过夜（或将细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约【yuē】8ml培养基，培养过夜）。第二【èr】天换【huàn】液【yè】并【bìng】检查【chá】细【xì】胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人卵巢癌细胞(CoCl)对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL 培养液后【hòu】吹【chuī】匀【yún】，将细【xì】胞悬液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例【lì】分【fèn】到新【xīn】的含8ml培养基的新【xīn】皿中【zhōng】或者瓶【píng】中。
方法【fǎ】二：可选择半数换液方【fāng】式，弃去半【bàn】数培养基后，将【jiāng】剩余【yú】细【xì】胞悬起，将细胞悬液按1: 2到【dào】1: 3的比例分【fèn】到新的含8ml培【péi】养基的新皿中【zhōng】或者【zhě】瓶中。
细胞冻【dòng】存：待细【xì】胞生长状态【tài】良好时【shí】，可进【jìn】行细胞冻存。悬浮细胞冻存时【shí】，应将细胞【bāo】收集，1000RPM条件下离【lí】心4分钟，少量保【bǎo】存上清液（防止细胞吸 走)，加【jiā】入部分【fèn】新鲜培养基，加入到冻存【cún】管【guǎn】中【zhōng】，在冻【dòng】存管中加入10%DMSO 后进行冻存。
 
注意事项：
收【shōu】到细胞后【hòu】，若发现干【gàn】冰己挥发【fā】干净、冻存管瓶盖脱落【luò】、破损及细胞有污染，请【qǐng】立【lì】即与我【wǒ】们电联。
所【suǒ】有动物细胞均视为有潜在【zài】的生物【wù】危害性，必【bì】须在【zài】二级生物安全台【tái】内操作，并请【qǐng】注意【yì】防护，所【suǒ】有废液及接触过此细胞的【de】器【qì】皿需要灭菌【jun1】后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：卵巢癌
2)形态：圆形或椭圆形，悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人卵巢癌细胞 (CoCl)运输和保【bǎo】存：可选择干冰运输【shū】及发【fā】送复苏存【cún】活细【xì】胞【bāo】方式：（1)干冰运【yùn】输，收到【dào】后立即【jí】转入液氮冻【dòng】存或直接复【fù】苏；（2)存活细【xì】胞，收到后应继续生长，传代达到【dào】细胞【bāo】生长【zhǎng】状态良好时，再进行冻【dòng】存。具体操作【zuò】见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。