人非小细胞肺腺癌细胞（Na-H157）

人非小细胞肺腺癌细胞(Na-H157)
细胞特性
1)来源：肺癌
2)形态：多角，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保存：可选择干冰运输及发送复苏存活细胞【bāo】方式：（1)干冰运输，收到【dào】后立即转【zhuǎn】入液氮冻存或直【zhí】接复苏；（2)存活细胞【bāo】，收到后应【yīng】继【jì】续生【shēng】长，传代达到细胞生长状态良好【hǎo】时，再进【jìn】行【háng】冻存。具体操【cāo】作见【jiàn】细【xì】胞培养步骤。
 
人非小细胞肺腺癌细胞(Na-H157)细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备RPIVM-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,添【tiān】加丙酮酸钠【nà】O.llg八，10mM Hepes)，90%;胎牛血清，10%。
2. 培养条件：气【qì】相【xiàng】：空气，95%;二氧化碳，5%。温度【dù】：37摄氏度，培养箱湿度为【wéi】70%-80%。
3.冻存【cún】液【yè】：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液氮【dàn】储存。
2)细胞处理：
复苏细胞【bāo】：将【jiāng】含有lmL细【xì】胞悬液的【de】冻存管在37°C水浴【yù】中迅【xùn】速摇晃解冻，加入4mL培养基【jī】混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液【yè】，补加l-2mL培养【yǎng】基后吹【chuī】匀【yún】。然【rán】后将【jiāng】所有细胞悬液加入培养瓶中培养过【guò】夜（或将【jiāng】
细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜【yè】）。第二天换液【yè】并检查细胞密【mì】度。细胞传代：如果细胞密【mì】度【dù】达【dá】80%-90%，即可【kě】进行传【chuán】代培【péi】养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上【shàng】清，用不【bú】含【hán】钙【gài】、镁离【lí】子的PBS润洗细胞9-21次。力口 2m丨【shù】消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶【píng】中【zhōng】，置于37°C培养箱【xiāng】中消【xiāo】化9-21分钟，然后在显【xiǎn】微镜下观察细胞【bāo】消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅【xùn】速拿回操作台，轻敲几下培养瓶【píng】后加【jiā】少【shǎo】量培养基终止【zhǐ】消化【huà】。
按【àn】6-8ml/瓶补加培【péi】养基，轻轻打【dǎ】匀后吸出【chū】，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培【péi】养液后吹【chuī】匀。
将细胞悬【xuán】液按1: 2到1: 5的比例分到【dào】新的含8ml培【péi】养基的新皿中【zhōng】或者细胞冻存：待细胞生【shēng】长状【zhuàng】态良【liáng】好时【shí】，可进行细胞冻存。贴【tiē】壁细胞【bāo】冻存【cún】时，弃去培养基后加【jiā】入【rù】少量【liàng】胰酶，细胞【bāo】变圆脱落后【hòu】，加入约lml含血清的培养基【jī】后，加入【rù】冻存管中，再【zài】添加1〇%DMSO后进行冻存【cún】。
 
人非小细胞肺腺癌细胞(Na-H157)注意事项：
收到细【xì】胞后，若发现干冰【bīng】己【jǐ】挥发干【gàn】净【jìng】、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即【jí】与我们电联。
所有动物细胞均视【shì】为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作【zuò】，并【bìng】请【qǐng】注意防护，所有【yǒu】废【fèi】液及接触过此【cǐ】细胞的【de】器【qì】皿需要【yào】灭菌后【hòu】方能丢弃。