人结肠癌细胞（COLO 205）

人鼻咽癌细胞(CNE2)
细胞介绍：
该CNE2细胞系为低分化鼻咽鳞状细胞癌细胞系。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备【bèi】 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO,90%;胎牛
血清，10%。
2. 培养条【tiáo】件：气【qì】相：空气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温【wēn】度：37摄【shè】氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基【jī】，10%DMSO,现用现配。液氮储【chǔ】存。
 
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞【bāo】：将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴【yù】中迅速【sù】摇晃解【jiě】冻【dòng】，加入4mL培养基混合【hé】均匀。在【zài】1000RPM条【tiáo】件下离【lí】心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养【yǎng】基后吹【chuī】匀。然后将所有细【xì】胞悬液加【jiā】入培养瓶中【zhōng】培养过【guò】夜（或将细胞悬液【yè】加入l〇cm皿中，加入【rù】约8ml培养基，培养过【guò】夜）。第二天换【huàn】液并检查细胞密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人鼻咽癌细胞(CNE2)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培【péi】养上清【qīng】，用不含钙【gài】、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。力口2m丨【shù】消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中【zhōng】，置于37°C培养箱中消化9-21分【fèn】钟【zhōng】，然后在显微【wēi】镜下观察细胞消化情况，若细【xì】胞大部 分变【biàn】圆并【bìng】脱落，迅速【sù】拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量【liàng】培【péi】养基终止 消化。按6-8ml/瓶补加培养【yǎng】基，轻轻【qīng】打匀后吸【xī】出，在1000RPM条件下离心【xīn】4分钟，弃去上清液，补加【jiā】l-2mL培养液后吹匀【yún】。将细【xì】胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新【xīn】的含【hán】8ml培养基的新【xīn】皿中【zhōng】或【huò】者瓶【píng】中。
细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可【kě】进【jìn】行细胞冻存。贴壁细胞【bāo】冻存时【shí】，弃去培养基【jī】后加【jiā】入少量【liàng】胰酶，细胞【bāo】变圆脱落后，加入约【yuē】lml含【hán】血清的培养基【jī】后加入冻存管【guǎn】中，再添加1〇%DMSO后进【jìn】行冻存【cún】。
 
注意事项：
收到细【xì】胞后，若发【fā】现【xiàn】干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损【sǔn】及细胞有【yǒu】污染，请立即与【yǔ】我们电【diàn】联。
所有【yǒu】动【dòng】物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生【shēng】物安全【quán】台内【nèi】操作，并请注意防【fáng】护，所【suǒ】有废液及接【jiē】触过此【cǐ】细【xì】胞的器皿【mǐn】需【xū】要灭菌后方能丢弃。
 
人鼻咽癌细胞(CNE2)细胞特性：
1)来源：鼻咽癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存：使用T25瓶充液发送活【huó】细胞。收【shōu】到细胞后，请先在显微镜下检查细【xì】胞生长状态，并将T25瓶【píng】置于培养【yǎng】箱约【yuē】6h或过夜【yè】后，再【zài】次检查细胞【bāo】状态。若状态良好【hǎo】，可【kě】进行细胞【bāo】后续处理【lǐ】操作，按照【zhào】以下方【fāng】式进【jìn】行。若发现可疑污染物【wù】，请及【jí】时与我们取得电【diàn】联。
细胞用途：仅供使用。