人纤维肉瘤细胞（HT-1080）

人纤维肉瘤细胞(HT-1080)
细胞介绍
这株细胞含有活化的N-ras癌基因。
 
细胞特性
1)来源：结缔组织；纤维肉瘤
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微【wēi】镜下确认细胞生长【zhǎng】状态，去掉封【fēng】口膜并将T25瓶置【zhì】于37°C培养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细胞长满（90%以上）请【qǐng】及时进行细胞传代，传代【dài】培养用6ml本公司【sī】附带的【de】*培养【yǎng】基【jī】。
5.接到细胞次日，请检查细【xì】胞是否【fǒu】污染，若发现污【wū】染或疑似污染，请【qǐng】及时与【yǔ】我们取得电联【lián】。
 
人纤维肉瘤细胞(HT-1080)细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备MEM a培养【yǎng】基(MEM a，GIBCO)，90%;胎牛血【xuè】清，10%。
2. 培【péi】养条件：气相：空气，95%;二氧【yǎng】化碳，5%。温度：37°C，培养箱湿度【dù】为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含有lmL细胞【bāo】悬液的冻存【cún】管迅【xùn】速放【fàng】入37°C水浴中（水【shuǐ】面要低于冻存管盖部）摇【yáo】晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培【péi】养基的15ml离心管【guǎn】中混【hún】合均【jun1】匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培【péi】养基后【hòu】吹匀【yún】。然后将所【suǒ】有细胞悬液移入含【hán】有5ml培养基的培【péi】养瓶中培【péi】养过夜。
第二天换液并检【jiǎn】查【chá】细胞密度。细胞传代：如果细【xì】胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞，传【chuán】代可参考以下【xià】方法：弃【qì】去培养上清，用不含钙、镁离子【zǐ】的【de】PBS润【rùn】洗【xǐ】细【xì】胞9-22次【cì】。力口【kǒu】 2m丨消（0.25%Trypsin0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培【péi】养箱中【zhōng】消化9-22分钟，然后在显微【wēi】镜下【xià】观察细胞消化【huà】情况，若细胞大部【bù】分变【biàn】圆并脱落【luò】，迅速拿回操作台，轻敲几【jǐ】下【xià】培养瓶后加入3ml此细【xì】胞的培养基终【zhōng】止消化。
轻【qīng】轻吹【chuī】打后吸出，移入15ml离心管【guǎn】中，在1000RPM条【tiáo】件【jiàn】下离【lí】心4分钟【zhōng】，弃去上清液，加入lmL培养液后吹匀。移入【rù】到事先【xiān】准【zhǔn】备好【hǎo】的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养【yǎng】基的T-75培养【yǎng】瓶【píng】中培【péi】养。细胞【bāo】冻存：待细胞生长状态良好时，可进行【háng】细胞冻【dòng】存。贴【tiē】壁细胞冻存时【shí】，先要消化处理【lǐ】并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代【dài】方法的9-22步骤进行，后的重悬液使用血清。悬浮细胞直接计数后离心，用血清重悬浮【fú】，加DMSO至终浓度【dù】为10%。加【jiā】入【rù】DMSO后【hòu】迅速混匀，按【àn】每lml的【de】数量分配到冻存管中【zhōng】。本公【gōng】司【sī】按每个冻存管细胞数【shù】目大于1X106个细胞冻存【cún】。
 
人纤维肉瘤细胞(HT-1080)注意事项：
收到细胞后，若【ruò】发【fā】现干冰己挥发干净、冻存管【guǎn】瓶盖脱落、破损及细胞有污【wū】染，请立即与【yǔ】我们【men】电联【lián】。
所【suǒ】有动物【wù】细胞均视为有【yǒu】潜在的生【shēng】物危害性，必须【xū】在二级生物安全台【tái】内操作，并请注意防护，所有废液及接触过【guò】此细胞的器【qì】皿【mǐn】需要灭菌【jun1】后方能丢弃。