非洲绿猴SV40转化的肾细胞（C0S-7）

非洲绿猴SV40转化的肾细胞(C0S-7)
细胞介绍
此细胞【bāo】株源自CV-1细胞【bāo】株【zhū】，经带有编码野【yě】生型T抗原【yuán】的起始失活突变的SV40转染得【dé】到。
 
细胞特性
1)来源：非洲绿猴肾
2)形态：成纤维细胞，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先【xiān】在显微镜下确【què】认细胞生长【zhǎng】状【zhuàng】态，去掉封口【kǒu】膜并将【jiāng】T25瓶置于37°C培养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果【guǒ】细胞长满（90%以【yǐ】上【shàng】）请及【jí】时进行细胞传代，传代培养【yǎng】用【yòng】6ml本公司附带的*培养【yǎng】基。
5.接到细胞次日，请检【jiǎn】查细【xì】胞是【shì】否污染，若发【fā】现污染或疑似污【wū】染【rǎn】，请及【jí】时与我们取得电联。
 
非洲绿猴SV40转化的肾细胞(C0S-7)细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 DMEM 培养基(DMEM，GIBCO)，90%;胎牛血【xuè】清，10%。
2. 培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培【péi】养箱【xiāng】湿度【dù】为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的【de】冻存管迅速放入37°C水【shuǐ】浴中（水面要低于【yú】冻【dòng】存管盖部）摇晃【huǎng】解冻，移入【rù】事先准备好的【de】含有4mL培【péi】养基的15ml离心管中混合均【jun1】匀【yún】。在1000RPM条【tiáo】件下离心4分钟，弃【qì】去【qù】上清液，加【jiā】入lmL培【péi】养基后【hòu】吹匀。然【rán】后将所有细胞悬液移入含有5ml培【péi】养【yǎng】基的【de】培养瓶中培养【yǎng】过夜。第二天换【huàn】液并检查细胞密度。细胞传代【dài】：如【rú】果细胞【bāo】密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞，传代可参【cān】考以下【xià】方【fāng】法：弃去培【péi】养【yǎng】上清，用不【bú】含钙、镁【měi】离子的PBS润洗细胞【bāo】9-21次。力【lì】口 2m丨消化液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中【zhōng】，置于【yú】37°C培养箱中【zhōng】消【xiāo】化【huà】9-21分钟，然后在显【xiǎn】微镜下观【guān】察细胞消化情况，若细【xì】胞大【dà】部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻【qīng】敲【qiāo】几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基【jī】终止消化。轻轻【qīng】吹打后【hòu】吸出，移【yí】入15ml离心管【guǎn】中，在1000RPM条件下【xià】离心4分【fèn】钟，弃去【qù】上清液，加入lmL培养液后【hòu】吹匀【yún】。移入到事先准备好的含有5ml基的T-25培【péi】养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。细胞冻存：待【dài】细胞生长状态良好时，可进行细胞冻【dòng】存【cún】。贴壁细【xì】胞冻存时，先要【yào】消【xiāo】化处理并【bìng】进行细【xì】胞计数。消【xiāo】化方法按照细胞传代方法【fǎ】的9-21步骤进行，后的重悬液使用【yòng】血清【qīng】。悬浮细胞直接计数后离心，用血清重悬【xuán】浮，加DMSO至【zhì】终浓度为10%。加【jiā】入DMSO后迅速混【hún】匀，按每lml的数量分配到冻存管中。本公司按每个冻存【cún】管细胞数【shù】目大【dà】于1X106个细胞冻存。
 
非洲绿猴SV40转化的肾细胞(C0S-7)注意事项：
收到细胞后，若发现干【gàn】冰己【jǐ】挥【huī】发【fā】干【gàn】净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞【bāo】有污染【rǎn】，请立即与我们【men】电联。
所有动【dòng】物细【xì】胞【bāo】均视为有潜在的生物【wù】危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请【qǐng】注意防护，所有【yǒu】废【fèi】液及接【jiē】触过此细胞的器【qì】皿【mǐn】需要灭菌后方【fāng】能丢【diū】弃。